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文檔簡介
1、腎纖維化是幾乎所有慢性腎臟疾病進展到終末期腎功能衰竭的共同通路。腎小管-間質的損害與腎功能毀損密切相關。腎小管-間質的損傷在病理上表現(xiàn)為腎小管上皮細胞的變性、萎縮和消失,間質纖維化以及炎癥細胞浸潤。腎小管上皮細胞在RIF過程中起極其重要的作用。腎小管上皮細胞在各種致病因子作用下轉分化成肌成纖維細胞,該細胞游走而使腎小管完整性受損,分泌大量的細胞外基質,以及許多炎癥因子,如轉化生長因子-β(TGF-β)?;罨蟮哪I小管上皮細胞增加了趨化因
2、子如單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1),RANTES等的分泌,從而趨化各種炎癥細胞浸潤并激活其產(chǎn)生各種炎癥因子及細胞因子。這些因素的共同作用下最終導致RIF。白細胞介素-18(IL-18)是一新發(fā)現(xiàn)的主要由單核-巨噬樣細胞分泌的單核因子,能夠強烈誘導γ-干擾素(IFN-γ)及其它細胞因子的產(chǎn)生和活化。在許多慢性腎病中,研究發(fā)現(xiàn)在血、尿及腎組織中有IL-18異常表達,并且IL-18的表達量與腎小管-間質的損害程度呈正相關。推測IL-18參
3、與腎小管-間質的損傷。我們前期體外研究提示IL-18促進腎小管上皮細胞的轉分化,表達a-SMA,促進腎小管上皮細胞凋亡。本研究擬進一步通過觀察IL-18對體外培養(yǎng)細胞表達和分泌Ⅳ膠原(Col-Ⅳ)及趨化因子MCP-1的影響,進一步明確IL-18在慢性腎病中的作用。 [方法]應用細胞培養(yǎng)技術培養(yǎng)人近曲小管上皮細胞株(HK-2)。0(對照)、0.1、1、10、100ng/mL的IL-18作用于HK-2細胞24h、48h和72h。運用
4、逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測Col-Ⅳ及MCP-1的信使核糖核酸(mRNA)表達水平。采用酶聯(lián)免疫吸附檢測法(ELISA)測定細胞培養(yǎng)上清中Col-Ⅳ及MCP-1分泌水平。 [結果] 1.IL-18使HK-2細胞合成Col-Ⅳ及MCP-1mRNA增加 0(對照)、0.1、1、10、100ng/mL的IL-18作用于HK-2細胞24h、48h和72h后,RT-PCR檢測其對HK-2細胞表達Col-Ⅳ及M
5、CP-1mRNA的影響。結果示IL-18劑量和時間依賴性地增加Col-Ⅳ及MCP-1mRNA的表達。 2.IL-18使HK-2細胞分泌Col-Ⅳ及MCP-1蛋白增加 0(對照)、0.1、1、10、100ng/mL的IL-18作用于HK-2細胞24h、48h和72h后,ELISA法檢測其對HK-2細胞分泌Col-Ⅳ及MCP-1蛋白的影響。結果示IL-18呈劑量和時間依賴性地使HK-2細胞分泌Col-Ⅳ蛋白增加。而HK-2細
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