鈣離子對GHS大鼠腎小管上皮細(xì)胞cbfα1和osterix表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討鈣離子對GHS大鼠腎小管上皮細(xì)胞cbfα1和osterix轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響及其是否存在類似血管異位鈣化的相關(guān)調(diào)控機(jī)制。
　　方法：原代培養(yǎng)GHS大鼠腎小管上皮細(xì)胞,待其生長成片時轉(zhuǎn)入培養(yǎng)板中,加入不同濃度的鈣溶液共同孵育12、24和48小時。實(shí)驗(yàn)共分五組:陰性對照組(+PBS);鈣I組(+0.5mmol/LCa2+);鈣II組(+1.0mmol/LCa2+);鈣III組(+1.5mmol/LCa2+);鈣IV組(+2.

2、0mmol/LCa2+)。各組均采用RT-PCR檢測cbfα1和osterixmRNA的表達(dá),westernblotting法測定其蛋白質(zhì)表達(dá)。
　　結(jié)果：RT-PCR:鈣離子處理GHS大鼠腎小管上皮細(xì)胞24h,鈣I~IV組cbfα1基因mRNA相對表達(dá)量分別是陰性對照組的1.25倍、1.58倍、1.92倍和1.82倍。鈣II~IV組vs對照組(P﹤0.05);鈣III組vs鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。鈣I~IV組oste

3、rix基因mRNA相對表達(dá)量分別是陰性對照組的1.41倍、1.60倍、2.13倍和1.85倍。鈣I~IV組vs對照組(P﹤0.05);鈣III組vs鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。Westernblotting:鈣離子刺激24h鈣I~IV組cbfα1蛋白相對表達(dá)量分別為0.98±0.11,1.15±016,1.38±0.27,1.24±0.21,而陰性對照組為0.81±0.11;鈣II~IV組vs對照(P<0.05);鈣III組vs

4、鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。鈣I~IV組osterix蛋白相對表達(dá)量分別1.40±0.25,1.58±0.33,1.92±0.43,1.73±0.38,而陰性對照組1.20±0.20;鈣II~IV組vs對照組(P<0.05);鈣III組vs鈣I、II、IV組(P﹤0.05)。鈣III(1.5mmol/lCa2+)組cbfα1和osterixmRNA和蛋白相對表達(dá)量0~24h逐漸升高,24h達(dá)峰值(P<0.05),24~48h逐漸