高糖對(duì)腎小管上皮細(xì)胞MCP-1、ICAM-1、NF-κB和FN的影響及疏血通的干預(yù)作用.pdf

1、目的：觀察高糖對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)產(chǎn)生單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、細(xì)胞間黏附分子(ICAM-1)、核因子-kappaB(NF-k B)和纖維連接蛋白(FN)的影響，探討炎癥反應(yīng)在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中的作用，并應(yīng)用疏血通注射液干預(yù)，探討該藥對(duì)糖尿病腎病(DN)的可能作用及機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)HK-2細(xì)胞，分為5組：(1)對(duì)照組(葡萄糖濃度：5.5mmol/L)(2)高糖組(葡萄糖濃度：25mmol/L)(3)高

2、糖+疏血通(1μl/m1)組(4)高糖+疏血通(5μl/ml)組(5)高糖+疏血通(10μl/m1)組，分別于24h、48h、72h留取樣本進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MCP-1和FN的分泌情況，免疫組化法檢測(cè)ICAM-1在細(xì)胞內(nèi)的分布及含量，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)-檢測(cè)NF-κBmRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1、高糖組細(xì)胞上清液中MCP-1、FN含量以及細(xì)胞ICAM-1和N

3、F-k BmRNA表達(dá)較對(duì)照組在24h、48h、72h均顯著增加(P<0.01)。 2、相關(guān)分析顯示MCP-1、ICAM-1、NF-κB及FN各因子之間均存在正相關(guān)關(guān)系(P<0.01)。 3、應(yīng)用疏血通干預(yù)，與高糖組比較，MCP-1和FN含量在1μl/ml濃度組72h出現(xiàn)下降，5μl/ml組48h開(kāi)始下降，10μl/ml組24h開(kāi)始下降；NF-κBmRNA和ICAM-1表達(dá)在低濃度組(1μl/ml)48h開(kāi)始減少，中高濃

4、度組(5μl/ml和10μl/ml)24h開(kāi)始減少。 結(jié)論 1、高糖環(huán)境可導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞MCP-1、ICAM-l、NF-κB和FN水平顯著增加，提示DN與炎癥機(jī)制有關(guān)。 2、MCP-1、ICAM-1、NF-κB、和FN各因子之間均存在正相關(guān)關(guān)系，提示腎小管間質(zhì)炎癥病變促進(jìn)腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)程，同時(shí)這些炎癥因子間相互有協(xié)同作用。 3、疏血通注射液能減輕NF-k B表達(dá)，阻遏下游炎癥細(xì)胞因子MCP-1、IC