高糖和oxLDL對HUVEC-12細(xì)胞株LOX-1和IL-1β表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞-12細(xì)胞株(HUVEC-12) LOX-1和IL-1β表達(dá)的影響，以及PPARγ激動劑ciglitazone對ox-LDL和高糖誘導(dǎo)的LOX-1表達(dá)的影響。 方法：分別用不同濃度的ox-LDL（0、20、40、80μg/ml）和不同濃度的葡萄糖(0、5.6、11.2、22.4、44.8mmol/L及甘露醇對照組)與HUVEC-12共同孵育24h，然后將ox-LD

2、L和22.4mmol/L葡萄糖與HUVEC-12共孵育24小時，用RT-PCR、流式細(xì)胞儀分別檢測細(xì)胞中LOX-1 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)；用RT-PCR檢測細(xì)胞IL-1β mRNA的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA法）檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β的分泌量。分別用40μg/ml的ox-LDL和22.4mmol/L高糖加入10μmol/L的PPARγ激動劑ciglitazone共孵育HUVEC-12細(xì)胞24小時，用RT-PCR和Weste

3、rn blot分別檢測細(xì)胞中LOX-1 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。 結(jié)果：隨著ox-LDL和D-葡萄糖濃度的增加，LOX-1 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)逐漸增加，IL-1β mRNA的表達(dá)和分泌量也逐漸增加。用40μg/ml的ox-LDL和22.4mmol/L的高糖共孵育HUVEC-12細(xì)胞24小時后，LOX-1和IL-1β的表達(dá)也是上調(diào)的。用10 ng/ml的IL-1β處理HUVEC-12細(xì)胞24小時后，與空白對照組相比，LOX-1

4、 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)也是增加的。分別用40μg/ml的ox-LDL和22.4mmol/L高糖加入10μmol/L的ciglitazone共同孵育HUVEC-12細(xì)胞24小時后，同空白對照組相比， ciglitazone可以降低ox-LDL和高糖誘導(dǎo)的LOX-1的表達(dá)。 結(jié)論： Ox-LDL和高糖呈劑量依賴性增加人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞LOX-1和IL-1β的表達(dá)水平；IL-1β也可上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞LOX-1的表達(dá)；PPARγ激動