ADMA對單核細胞分化為巨噬細胞的影響及其對MCP-1及LOX-1表達的作用.pdf

1、目的：動脈粥樣硬化(AS)是動脈的一種慢性炎癥性病變，其發(fā)生過程中單核細胞向巨噬細胞的轉化是個非常關鍵的環(huán)節(jié)。不對稱二甲基精氨酸(ADMA)作為內源性一氧化氮合酶抑制劑(NOS)可誘導NO解偶聯(lián)并增加氧自由基的產生，參與促進AS發(fā)生發(fā)展的炎癥反應過程，然而，ADMA在單核細胞轉化為巨噬細胞過程中的作用尚不明確。本課題通過觀察ADMA對單核細胞轉化為巨噬細胞過程中分泌重要炎癥因子單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)及植物凝集素樣氧化低密度脂

2、蛋白受體-1(LOX-1)的影響，探討ADMA在單核細胞轉化為巨噬細胞過程中的作用。
　　 方法：(1)ADMA對單核細胞分泌MCP-1的影響：培養(yǎng)人單核細胞，分別用ADMA(20mmol/L)、ADMA(20umol/L)及L-精氨酸(1.2mmol/L)孵育單核細胞48h，酶聯(lián)免疫吸附法測定上清液中MCP-1含量，逆轉錄聚合酶鏈反應法測定MCP-1mRNA的表達；(2)ADMA對單核細胞轉化為巨噬細胞過程中LOX-1表達的影

3、響：培養(yǎng)人單核細胞，并用佛波酯誘導其分化為巨噬細胞，在此過程中分別用ADMA(20umol/L)、ADMA(20umol/L)及L-精氨酸(1.2mmol/L)、L-精氨酸(1.2mmol/L)孵育單核細胞48h，Westernblotting法測定細胞中LOX-1的蛋白表達量，逆轉錄聚合酶鏈反應法測定LOX-1mRNA的表達。所有數據以均數±標準差表示，采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學處理，多組間比較用單因素方差分析及析因分析，采用

4、q檢驗進行兩兩比較。P＜0.05確定差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 (1)與空白對照組相比，20umol/LADMA作用于人單核細胞48h，MCP-1的mRNA和蛋白表達水平均明顯提高(P＜0.01)。
　　 (2)與空白對照組相比，20umol/LADMA+1.2mmol/LL-精氨酸作用于人單核細胞48h，MCP-1的mRNA和蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　 (3)與20

5、mmol/LADMA相比，20umol/LADMA+1.2mmol/LL-精氨酸作用于人單核細胞48h，MCP-1的mRNA和蛋白表達水平明顯降低(P＜0.01)。
　　 (4)與空白對照組相比，20umol/LADMA作用于加入佛波酯的人單核細胞48h，LOX-1的mRNA表達升高(P＜0.05)，蛋白表達水平明顯升高(P＜0.01)。
　　 (5)與空白對照組相比，20umol/LADMA+1.2mmol/LL-精氨

6、酸作用于加入佛波酯的人單核細胞48h，LOX-1的mRNA和蛋白表達水平有提高(P＜0.05)。而單用1.2mmol/LL-精氨酸作用于加入佛波酯的人單核細胞48h，LOX-1的mRNA和蛋白表達水平與空白對照組相比無明顯差異(P＞0.05)。
　　 (6)與20umol/LADMA組相比，20umol/LADMA+1.2mmol/LL-精氨酸作用于加入佛波酯的人單核細胞48h，LOX-1的mRNA表達水平降低(P＜0.05)，

7、蛋白表達水平明顯降低(P＜0.01)，單用1.2mmol/LL-精氨酸作用于加入佛波酯的人單核細胞48h，LOX-1的mRNA降低(P＜0.05)，蛋白表達水平與20umol/LADMA組相比明顯降低(P＜0.01)。
　　 (7)與20umol/LADMA+1.2mmol/LL-精氨酸相比，單用1.2mmol/LL-精氨酸作用于加入佛波酯的人單核細胞48h，LOX-1的mRNA和蛋白表達水平降低(P＜0.05)。