血管緊張素Ⅱ?qū)奘杉?xì)胞趨化、MMPs表達(dá)及平滑肌細(xì)胞MCP-1表達(dá)的影響.pdf

1、背景
　　動脈粥樣硬化的發(fā)生機(jī)制至今仍沒有確切的定論，主要有脂質(zhì)浸潤學(xué)說、損傷反應(yīng)學(xué)說、內(nèi)皮功能學(xué)說等。隨著不斷深入研究，逐漸發(fā)現(xiàn)在AS的基本病理病變的過程中，從脂質(zhì)條紋到纖維斑塊和粥樣斑塊，乃至不穩(wěn)定斑塊的生成、破裂和血栓形成，始終都有各種炎癥細(xì)胞和大量炎癥介質(zhì)參與，從而證實動脈粥樣硬化是一種炎癥性疾病，是具有慢性炎癥反應(yīng)特征的病理過程，其發(fā)展始終伴隨炎癥反應(yīng)。
　　血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（

2、RAS）中主要的活性肽產(chǎn)物。血管緊張素Ⅱ能使全身小動脈收縮而升高血壓，此外，還可促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)分泌醛固酮，醛固酮作用于腎小管，起保鈉、保水、排鉀作用，從而引起血量增多，血壓升高。近年來大量的研究表明，AngⅡ還參與了動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展。
　　研究發(fā)現(xiàn)，給予遺傳性高脂血癥的轉(zhuǎn)基因兔AngⅡ，會導(dǎo)致兔主動脈發(fā)生粥樣硬化，并且觀察到在大動脈發(fā)生粥樣硬化時能發(fā)現(xiàn)中膜病變部位出現(xiàn)兩種現(xiàn)象:1.巨噬細(xì)胞的大量聚集;2.病變部位的平滑肌筋

3、膜和膠原纖維消失，彈力纖維的斷裂溶解。本實驗基于以上現(xiàn)象進(jìn)行研究，旨在探討AngⅡ?qū)奘杉?xì)胞聚集和基質(zhì)溶解的機(jī)制。
　　目的
　　研究血管緊張素Ⅱ?qū)用}粥樣硬化中膜病變處的大量巨噬細(xì)胞聚集和基質(zhì)溶解所起的作用。
　　方法
　　1.人U937細(xì)胞系的傳代培養(yǎng)和兔血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。
　　2.對人U937細(xì)胞和兔血管平滑肌細(xì)胞加入不同濃度的AngⅡ孵育24小時，提取U937細(xì)胞上清液、U937細(xì)

4、胞和SMCs的RNA。
　　3.Boyden小室檢測U937細(xì)胞的趨化。
　　4.WesternBlot檢測U937細(xì)胞上清液中基質(zhì)金屬蛋白酶的蛋白水平。用Real-timePCR檢測U937細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶的mRNA水平。
　　5.用Real-timePCR法檢測SMCs單核細(xì)胞趨化蛋白1的mRNA水平。
　　結(jié)果
　　1.Boyden趨化實驗中，AngⅡ組作用后，U937細(xì)胞趨化數(shù)量與對照組相比增加。

5、
　　2.在Real-timePCR和WesternBlot實驗中，AngⅡ組作用后，U937細(xì)胞與對照組相比，MMP-9和MMP-12的mRNA水平和蛋白水平增加。
　　3.在Real-timePCR實驗中，AngⅡ組作用后，SMCs與對照組相比，MCP-1的mRNA水平增加。
　　結(jié)論
　　1.AngⅡ?qū)ε囵B(yǎng)的巨噬細(xì)胞有趨化作用。
　　2.AngⅡ能刺激培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞增加對MMP-9和MMP-12的表達(dá)