自噬聯(lián)合mTOR通路或磷酸戊糖途徑雙重抑制對腎細(xì)胞癌治療的研究.pdf

1、自噬聯(lián)合roTOR通路或磷酸戊糖途徑雙重抑制對腎細(xì)胞癌治療的研究MechanisticAnalysisofTreatmentswithCombinationofAutophagyandmTORorPentosePhosphatePathwayInhibitorsinRenalCellCarcinoma博士研究生：馮陳陳導(dǎo)師：丁強(qiáng)教授專業(yè)：外科學(xué)(泌尿外科)導(dǎo)師小組成員：吳忠教授姜吳文教授徐罡副教授復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院泌尿外科二0一四年三

2、月復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要第部分自噬聯(lián)合mTOR通路雙重抑制對腎癌細(xì)胞的作用及其機(jī)制目的：探索腎癌細(xì)胞自噬水平以及mTOR活性，研究雙重抑制對腎癌細(xì)胞生長的作用以及相關(guān)機(jī)制。方法：RCC4、ACHN、7860、769P人腎癌細(xì)胞株及HK2人正常腎小管上皮細(xì)胞株均購自美國ATCC細(xì)胞庫。利用Westernblotting檢測腎癌細(xì)胞以及正常對照細(xì)胞的基本自噬水平以及mTOR信號通路蛋白表達(dá)的變化。對比單獨應(yīng)用mTOR或自噬抑制劑，以及

3、聯(lián)合抑制三種治療對腎癌細(xì)胞內(nèi)mTOR及自噬通路的影響。同時，通過結(jié)晶紫試驗研究mTOR及自噬的雙重抑制對腎癌細(xì)胞增殖的影響，并通過研究細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，探討自噬及mTOR雙重抑制對腎癌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：相對于正常腎小管上皮HK2細(xì)胞，mTOR活性在4種腎癌細(xì)胞中均明顯升高，7860、769P細(xì)胞基礎(chǔ)白噬水平較HK2輕度升高，而RCC4、ACHN細(xì)胞不僅基礎(chǔ)自噬水平較正常對照升高明顯，其mTOR通路亦過度激活，對此類腎癌細(xì)胞進(jìn)行