抑制磷酸肌醇通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)治療肝細(xì)胞癌的分子機(jī)制研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌是世界上第五常見的惡性腫瘤，發(fā)病率呈進(jìn)一步上升趨勢(shì)，其惡性程度高，病情進(jìn)展快，治療效果差，病死率高居世界癌癥病例中第三位。目前肝癌患者的平均生存期僅為3～6個(gè)月，3年生存率低于13％。進(jìn)一步探討肝癌治療的有效方法具有極為重要的臨床意義。 從細(xì)胞生物學(xué)角度看，腫瘤發(fā)生發(fā)展的基本機(jī)制不外乎是細(xì)胞分化異常、增殖過剩和凋亡障礙。失控性生長(zhǎng)和增殖及細(xì)胞凋亡受阻是惡性腫瘤細(xì)胞的重要特征。因此，抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化與凋亡

2、，從而使腫瘤細(xì)胞消亡或消除腫瘤細(xì)胞對(duì)機(jī)體的危害，是針對(duì)腫瘤發(fā)生和演變的關(guān)鍵環(huán)節(jié)而設(shè)計(jì)的治療方法，具有廣闊的發(fā)展前途。控制細(xì)胞增殖、分化和凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)異常是細(xì)胞轉(zhuǎn)化、演進(jìn)和腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵，控制腫瘤細(xì)胞的異常信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可控制惡性腫瘤的生長(zhǎng)。細(xì)胞內(nèi)許多信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)異常均可促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖、抑制肝癌細(xì)胞凋亡；阻斷或抑制肝癌細(xì)胞異常信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可調(diào)節(jié)基因表達(dá)，抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 磷酸肌醇信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)能力增強(qiáng)，表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)PI激酶

3、、PIP激酶、PLC活性增強(qiáng)和第二信使分子IP3和DG產(chǎn)生增加，在惡性腫瘤的生長(zhǎng)、增殖和演進(jìn)中起重要作用。抑制腫瘤細(xì)胞內(nèi)PI激酶和PIP激酶活性，可導(dǎo)致細(xì)胞IP3產(chǎn)生下降、細(xì)胞增殖能力下降甚至引起細(xì)胞死亡。但抑制磷酸肌醇通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)能否誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡目前尚不清楚；如能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡，其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的分子生物學(xué)機(jī)制如何?將磷酸肌醇信號(hào)通路抑制劑應(yīng)用于活體肝癌治療能否在體內(nèi)抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而控制肝癌增長(zhǎng)，達(dá)到治療腫瘤的目的

4、，目前尚不清楚。 本研究旨在探討磷酸肌醇信號(hào)通路抑制劑能否調(diào)節(jié)肝癌HepG2細(xì)胞系Fas、PTEN和survivin等基因表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；應(yīng)用磷酸肌醇信號(hào)通路抑制劑治療裸鼠移植人肝癌，探討抑制磷酸肌醇通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)能否調(diào)節(jié)在體肝癌細(xì)胞Fas、PTEN、survivin、bcl-2和bax等增殖和凋亡相關(guān)基因表達(dá)，抑制活體肝癌增長(zhǎng)，為臨床應(yīng)用磷酸肌醇通路抑制劑治療肝細(xì)胞癌提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分.抑制磷酸肌醇通路信

5、號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的體外實(shí)驗(yàn) 探討磷酸肌醇信號(hào)通路抑制劑三羥異黃酮(genistein)和五羥黃酮(quercetin)能否調(diào)節(jié)HepG2細(xì)胞Fas、PTEN和surviyin基因表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)緬胞凋亡。 第二部分.磷酸肌醇信號(hào)通路抑制劑治療裸鼠移植人肝癌的分子機(jī)制研究 探討應(yīng)用磷酸肌醇信號(hào)通路抑制劑genistein和quercetin能否調(diào)節(jié)裸鼠移植人肝癌細(xì)胞Fas、PTEN、bcl-2、bax和surv