肌肉浸潤性膀胱癌細(xì)胞系T-24導(dǎo)向肽篩選.pdf

1、目的：膀胱癌已成為泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率逐年上升。雖然約80％的膀胱癌患者最初表現(xiàn)為非侵入性、淺表性癌，但其復(fù)發(fā)率仍然很高，甚至有些患者會發(fā)展成浸潤性癌。根據(jù)國內(nèi)外膀胱腫瘤的診療指南：膀胱鏡檢查及活檢是最可靠的淺表性膀胱腫瘤的診斷方法，但膀胱鏡觀察的只是膀胱內(nèi)部結(jié)構(gòu)表面的一部分，并且光穿透膀胱組織時會在表面產(chǎn)生廣泛散射、反射的現(xiàn)象，造成深部組織的模糊不清，同時對微小腫瘤的識別相對較弱。隨著科技的不斷進(jìn)步，膀胱鏡和電切鏡已經(jīng)做

2、了一些改進(jìn)，但Xishuang等認(rèn)為TURBt術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)率沒有顯著減少。因此，要進(jìn)一步探索特異性強(qiáng)、陽性率高、能識別微小腫瘤的診療手段成為廣大臨床醫(yī)生的迫切需求。
　　 光學(xué)分子影像學(xué)的誕生給了廣大臨床醫(yī)生及泌尿系腫瘤的研究者帶來了全新的視角。光學(xué)分子影像學(xué)（OpticalMolecularImaging）是在蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)和現(xiàn)代光學(xué)影像技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新興研究領(lǐng)域。新型的光學(xué)分子影像技術(shù)依托于熒光或非可見光，通過

3、向體內(nèi)引入熒光物質(zhì)或熒光報告基因可以檢測到在組織表面之下，使顯像深度更進(jìn)一步，解決了傳統(tǒng)的光學(xué)影像方法依托于可見光在穿透組織的過程中在組織的表面發(fā)生廣泛的反射和散射現(xiàn)象，導(dǎo)致深層組織結(jié)構(gòu)模糊不清，不能識別的難題，進(jìn)一步應(yīng)用于膀胱腫瘤的診斷以及術(shù)中指導(dǎo)，為降低微小腫瘤的漏診率及腫瘤的復(fù)發(fā)率做出巨大貢獻(xiàn)。本實(shí)驗既題針對光學(xué)分子影像學(xué)基礎(chǔ)理論之一的特異性小分子多肽作初步研究。在此之前Lee等采用噬菌體展示肽庫技術(shù)篩選得到的膀胱癌特異性CSNR

4、DARRC多肽，組織切片上該序列能夠選擇性與人類膀胱癌組織結(jié)合，并陸續(xù)取得了相應(yīng)成果。本課題旨在研究篩選出浸潤性膀胱癌細(xì)胞T-24特異性小分子多肽，為后續(xù)的臨床診斷及治療研究打下基礎(chǔ)。
　　 方法：本實(shí)驗應(yīng)用噬菌體肽庫展示技術(shù)，選擇浸潤性膀胱癌細(xì)胞T-24為研究對象，入選標(biāo)準(zhǔn)為處于對數(shù)期生長的浸潤性膀胱癌T-24細(xì)胞。我們利用噬菌體展示七肽庫與性膀胱癌細(xì)胞T-24進(jìn)行3輪全細(xì)胞篩選及擴(kuò)增、純化，分析篩選后單克隆對膀胱癌細(xì)胞的特異