孤兒核受體NR4A1(Nur77)和NR4A3(Nor1)在急性白血病(AL)中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：NR4A3（Nor1）和NR4A1（Nur77）是高度同源的調(diào)節(jié)重疊靶基因轉(zhuǎn)錄的孤兒核受體。這兩個(gè)蛋白的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活性不依賴于配體，而是通過細(xì)胞特異性和刺激特異性的基因誘導(dǎo)和蛋白磷酸化方式調(diào)節(jié)。與激素、炎癥、促有絲分裂、凋亡和分化等多種細(xì)胞過程的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。它們可能作為增殖，凋亡和分化的平衡調(diào)節(jié)因子而起作用，而且可能與細(xì)胞對(duì)腫瘤發(fā)生的敏感性有關(guān)。國(guó)外有文獻(xiàn)報(bào)道，Nor1和Nur77為髓系白血病發(fā)生的腫瘤抑制基因，在鼠模型中研究發(fā)現(xiàn)

2、，Nur77和Nor1的缺失快速的導(dǎo)致了急性髓系白血?。ˋML）的發(fā)生，其可能機(jī)制包括：造血干細(xì)胞（HSCs）和髓系祖細(xì)胞的異常擴(kuò)增；AP-1轉(zhuǎn)錄因子JunB和c-Jun的低表達(dá)和對(duì)胞外凋亡信號(hào)（Fas-L和TRAIL）的反應(yīng)缺陷。研究顯示Nor1和Nur77的下調(diào)在人 AML中是個(gè)普遍的特征而不論其核型。所以Nor1和Nur77可能為AML的干預(yù)治療提供了潛在靶點(diǎn)。鑒于此，本研究旨在檢測(cè)NR4A1（Nur77）和NR4A3（Nor1）

3、在白血病和正常對(duì)照組中的表達(dá)并分析其意義。
　　 方法：本研究對(duì)象為72例急性白血?。╝cute leukemia，AL）患者。其中初治急性髓系細(xì)胞白血?。╝cute myeloid leukemia，AML）患者48例，AML緩解期患者8例，初治急性淋巴細(xì)胞白血?。╝cute lymphoblastic leukemia，ALL）患者16例。20例健康志愿者為正常對(duì)照組。應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（semi-quantit

4、ative reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR）、和定量RT-PCR方法檢測(cè)各組中Nur77、Nor1 mRNA的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 采用定量及半定量RT-PCR檢測(cè)Nur77、Nor1在AML初治組、ALL初治組、AML緩解組（CR）和正常對(duì)照組（NC）中的表達(dá)水平
　　 1.應(yīng)用半定量RT-PCR檢測(cè)Nur77mRNA在各組

5、中的陽性率并進(jìn)行比較：AML初治組Nur77mRNA陽性率（50％（24/48））低于正常對(duì)照組（陽性率為90％（18/20）），卡方檢驗(yàn)分析（卡方值=9.5648，P=0.002<0.05）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ALL初治組Nur77 mRNA陽性率87.5％（14/16），與正常對(duì)照組陽性率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（確切概率法比較P=1.000>0.05）。
　　 2.應(yīng)用熒光定量PCR檢測(cè)Nur77在各組中表達(dá)水平并進(jìn)行比較：AML初治

6、組Nur77表達(dá)水平（0.0041±0.0049）低于正常對(duì)照組（0.0146±0.0073）P=0.001<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AML緩解組表達(dá)水平（0.0068±0.0098）低于正常對(duì)照組，（P=0.002<0.05）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AML緩解組Nur77表達(dá)水平高于初治組，但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.452>0.05）。ALL初治組表達(dá)水平（0.0248±0.0556）與AML初治組表達(dá)水平（0.0041±0.0049）比較P

7、=0.0010<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ALL初治組表達(dá)水平與正常對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=-0.11>0.05）。
　　 3.應(yīng)用半定量RT-PCR檢測(cè)Nor1 mRNA在各組中的陽性率并進(jìn)行比較：AML初治組Nor1 mRNA陽性率（25％）低于正常對(duì)照組（90％）（卡方值=24.1937，P<0.05）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ALL初治組Nor1 mRNA陽性率（75％）與正常對(duì)照組（90％）比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（確切概率法比較P

8、=0.3738>0.05）。
　　 4.應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)Nor1 mRNA在各組中表達(dá)水平并進(jìn)行比較：AML初治組Nor1 mRNA表達(dá)水平（0.0501±0.0857）明顯低于正常對(duì)照組（4.8378±4.003）（P=0.032<0.05）。AML緩解組表達(dá)水平（1.3419±2.2105）低于正常對(duì)照組（4.8378±4.003）但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.116>0.05）。AML初治組表達(dá)水平明顯低于緩解組

9、，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.001<0.05）。ALL初治組表達(dá)水平（1.5421±2.2888）明顯高于AML初治組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.02<0.05）。ALL初治組表達(dá)水平與正常對(duì)照組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.058>0.05）。
　　 5.在48例AML初治組患者中，24例Nur77陽性，緩解率為70.8％（17/24），24例Nur77陰性，緩解率為33.3％（8/24）。Nur77陽性患者的緩解率高于Nur77陰性患

10、者，差別有顯著性（X2=6.762，P=0.009<0.05）。12例Nor1陽性患者緩解率為83.3％（10/12），明顯高于36例Nor1陰性患者緩解率（41.7％（15/36）），有顯著性差異（X2=6.261，P=0.012<0.05）。
　　 6.在AML初治組中Nur77的表達(dá)水平與外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)成負(fù)相關(guān)，r=-0.598，P=0.002<0.05。Nor1的表達(dá)水平與外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)成負(fù)相關(guān)r=-0.498，P=

11、0.014<0.05。
　　 7.Nur77和Nor1 mRNA在FAB不同分型AML中表達(dá)水平的比較無差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.在AML初治組患者中，Nur77mRNA和NorlmRNA表達(dá)水平明顯低于正常對(duì)照組（P<0.05）；在ALL初治組患者中，Nur77和Nor1 mRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照組比較無差異（P>0.05），提示Nur77與Nor1與白血病系列性有關(guān)。
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