PDCD4、TGF-β1在急性髓系白血病患者骨髓中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：白血病是一類源于造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病，白血病細(xì)胞在骨髓中大量增生，從而使正常造血功能受到抑制，同時白血病細(xì)胞又可浸潤其他器官和組織，影響其它組織器官的功能。雖然目前白血病的發(fā)病機(jī)制并不十分清楚，但是隨著現(xiàn)代實驗技術(shù)的進(jìn)步，人類對其發(fā)病機(jī)制有了進(jìn)一步的認(rèn)識和發(fā)現(xiàn)，其發(fā)生機(jī)制可能與基因突變、病毒感染、環(huán)境因素、及其他血液系統(tǒng)疾病等有關(guān)。而目前最新的研究表明，在白血病的發(fā)生發(fā)展中，細(xì)胞的無限增生及其調(diào)控異常起了重要作用。而生物體維

2、持自身穩(wěn)定的重要條件就是細(xì)胞增生和細(xì)胞凋亡間的平衡狀態(tài)，如果細(xì)胞出現(xiàn)凋亡受阻或增殖失控均有可能導(dǎo)致腫瘤形成。程序性細(xì)胞凋亡因子4(programmed cell death4，PDCD4)基因是因可以在凋亡中出現(xiàn)上調(diào)而得名，但是目前它的確切功能尚不完全清楚。但是現(xiàn)在越來越多的證據(jù)表明，此基因不僅可以影響轉(zhuǎn)錄、翻譯過程以及可以調(diào)節(jié)不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，而且其在抑制腫瘤形成方面可能也起了一定的作用。TGF-β1是一種常見的多效性細(xì)胞因子，它不

3、僅能有效刺激成纖維細(xì)胞的生長，修復(fù)創(chuàng)傷，而且還能調(diào)節(jié)造血，并可以抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。因此，本課題重點研究PDCD4和TGF-β1在急性髓性白血病骨髓中的表達(dá)及意義，初步探討其在白血病中的作用及可能的機(jī)制。
　　 方法：本研究所使用的標(biāo)本為2009年8月～2009年12月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院血液科住院患者，其中缺鐵性貧血（對照組）20例，男6例，女14例，27～70歲，平均39歲；急性髓系白血病初診患者（AML組）30例，男18例，

4、女12例，18～73歲，平均46歲；完全緩解組患者（AML-CR組）30例，男16例，女14例，16～67歲，平均41歲?；颊咴\斷均經(jīng)臨床、血常規(guī)、骨髓象及組織化學(xué)染色、免疫分型、染色體檢查確診。采用RT-PCR、ELISA和Western blotting三種方法分別從基因水平和蛋白水平檢測其骨髓單個核細(xì)胞中PDCD4、TGF-β1的表達(dá)情況，并分析相互間的相關(guān)性。采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。p＜0.05為差異有統(tǒng)計

5、學(xué)意義。
　　 結(jié)果：PDCD4、TGF-β1的RT-PCR結(jié)果均顯示，AML組mRNA的表達(dá)量明顯低于對照組（p＜0.05），AML-CR組表達(dá)量雖明顯高于AML組，但差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）。ELISA結(jié)果顯示，AML組TGF-β1的蛋白表達(dá)量明顯低于對照組和AML-CR組（p＜0.05）。Western blotting結(jié)果顯示，AML組PDCD4蛋白表達(dá)明顯低于對照組和AML-CR組（p＜0.05）。PDCD4

6、、TGF-β1蛋白在患者年齡和性別上的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05），PDCD4、TGF-β1的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系（p＜0.05）。
　　 結(jié)論：PDCD4mRNA水平和蛋白水平初診AML中表達(dá)明顯減低，提示對于初診AML患者骨髓單個核細(xì)胞中凋亡受阻，可能參與了白血病的發(fā)生發(fā)展。AML-CR組mRNA表達(dá)明顯高于AML組，但是沒有統(tǒng)計學(xué)意義，可能與本研究的樣本量少有關(guān)，擴(kuò)大AML-CR組和AML組患者的樣本量有可能會發(fā)現(xiàn)AM

7、L-CR組和AML組之間的差異。TGF-β1mRNA水平和蛋白水平初診AML中表達(dá)也出現(xiàn)了明顯減低，表明初診AML組患者骨髓中TGF-β1生成減少，使白血病細(xì)胞失去了增殖抑制而大量增長，加之缺乏TGF-β1對白血病細(xì)胞成熟分化的誘導(dǎo)作用，加速了病情的惡化。因此檢測AML患者的可溶性TGF-β1水平可作為病情診斷和預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。初診AML患者達(dá)到完全緩解后，TGF-β1mRNA的表達(dá)量雖明顯高于AML組，但是沒有統(tǒng)計學(xué)意義，而TGF