Hedgehog信號(hào)通路對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞體外血管形成的調(diào)控.pdf

1、目的：胃癌在我國(guó)的發(fā)病率呈持續(xù)上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響人類健康。目前研究證實(shí)，Hedgehog(Hh)信號(hào)通路可通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期，粘附侵襲，血管形成，凋亡等細(xì)胞事件參與多種腫瘤的的發(fā)生進(jìn)展，膠質(zhì)瘤相關(guān)癌基因1(Glioma-associated oncogene homolog，Gli1)作為該通路的效應(yīng)因子，成為評(píng)價(jià)該通路活化程度的關(guān)鍵因子。血小板源性生長(zhǎng)因子-D（Platelet-derived growth factor D，PDGF-

2、D）作為強(qiáng)烈的促腫瘤血管形成因子，已被證實(shí)在多種腫瘤中異常高表達(dá)。但是Hh信號(hào)通路是否可以通過(guò)調(diào)控PDGF-D的表達(dá)來(lái)影響腫瘤血管形成尚不明確。本研究擬通過(guò)使用Hh信號(hào)通路特異阻斷劑環(huán)巴明(Cyclopamine)處理胃癌SGC-7901細(xì)胞，觀察處理前后Gli1和PDGF-D的mRNA和蛋白水平的變化及癌細(xì)胞體外形成血管管腔樣結(jié)構(gòu)的能力，來(lái)探討Hedgehog信號(hào)通路調(diào)控腫瘤血管形成的可能機(jī)制。
　　方法：常規(guī)培養(yǎng)人胃癌SGC-

3、7901細(xì)胞和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)，將SGC-7901細(xì)胞分為對(duì)照組A（未給藥）、實(shí)驗(yàn)組B（環(huán)靶明終濃度5μmol/L）及實(shí)驗(yàn)組C（環(huán)靶明終濃度10μmol/L），培養(yǎng)48h后，免疫熒光檢測(cè)各組Gli1和PDGF-D在SGC-7901細(xì)胞中的表達(dá);通過(guò)小管形成試驗(yàn)和血管擬態(tài)試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞處理前后血管形成能力的變化;RT-PCR和Western-Blot檢

4、測(cè)細(xì)胞處理前后Gli1、PDGF-D的mRNA和蛋白表達(dá)變化，并對(duì)二者mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：Gli1和PDGF-D在各組SGC-7901細(xì)胞中均有表達(dá);實(shí)驗(yàn)組SGC-7901細(xì)胞的體外血管形成能力較對(duì)照組下降，且呈劑量依賴性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組Gli1和PDGF-D的mRNA和蛋白表達(dá)較對(duì)照組均受到顯著抑制，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且二者mRNA和蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)