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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討siRNA干擾Survivin基因表達(dá)對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞周期、增殖、凋亡的影響及其作用機(jī)制的初步探討。
方法:針對(duì)Survivin mRNA序列設(shè)計(jì)合成siRNA轉(zhuǎn)染人胃癌SGC-7901細(xì)胞。MTT法檢測(cè)SGC-7901細(xì)胞增殖;RT-PCR法檢測(cè)Survivin、Caspase-3基因表達(dá);Western blot檢測(cè)Survivin、Caspase-3蛋白表達(dá);細(xì)胞免疫組織化學(xué)檢測(cè)Survivin蛋白
2、表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)SGC-7901細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果:Survivin siRNA能夠有效抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞中Survivin的表達(dá),與空白對(duì)照組比較,Survivin siRNA組人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖速度減緩(p<0.05);PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示, Survivin siRNA組凋亡率為(30.0%±0.85),高于空白對(duì)照組(1.61%±0.46)、脂質(zhì)體組(2.35%±0.
3、51)及陰性對(duì)照組(3.80%±0.73)(p<0.05);Survivin siRNA組細(xì)胞聚集在G0/G1期,S期細(xì)胞減少(p<0.05);Survivin在 mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著下調(diào)(p<0.05),而Caspase-3在 mRNA水平變化不明顯(p>0.05),而在蛋白表達(dá)水平明顯升高(p<0.05)。
結(jié)論
1.Survivin siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后可明顯抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞中Surviv
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