荷包牡丹堿對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討荷包牡丹堿對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長的抑制作用及其可能的機(jī)制，為胃癌的藥物治療提供一定的體外實(shí)驗(yàn)研究的依據(jù)。
　　方法：將人胃癌SGC-7901細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)于含10％胎牛血清、青霉素-鏈霉素溶液(100X)、pH為7.2-7.3的RPMI1640培養(yǎng)液中，在37C、5％CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h、48h、72h。實(shí)驗(yàn)分陰性對(duì)照組、溶劑DMSO組及荷包牡丹堿(25μmol/l、50μmol/l、100μmol

2、/l、200μmol/l)作用組。分別采用:1）四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定細(xì)胞體外增殖情況;2）Hoechest33258染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化;3）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;4）Westernblot法檢測(cè)Bax、Bcl-2和Caspase-3的表達(dá)。
　　結(jié)果：1).SGC7901細(xì)胞與不同濃度的荷包牡丹堿培養(yǎng)后，細(xì)胞生長受到不同程度的抑制，并隨時(shí)間的延長抑制率逐漸升高，24h、48h、72h各時(shí)間段，荷包牡丹堿各濃度

3、組與陰性對(duì)照組相比，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而陰性對(duì)照組與溶劑組相較，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。2).藥物作用72h后，行Hoechest33258染色可見陰性對(duì)照組及DMSO組細(xì)胞的細(xì)胞核呈卵圓形，染色均勻，藥物荷包牡丹堿組可見部分細(xì)胞核熒光增強(qiáng)，胞核縮小呈濃縮現(xiàn)象，細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、熒光顯著增強(qiáng)，并有部分細(xì)胞核邊緣化，甚至裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體。3）.流式細(xì)胞術(shù)分析顯示:作用72h后，藥物荷包牡丹堿200

4、μmol/l組與陰性對(duì)照組及DMSO組相較，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而陰性對(duì)照組與DMSO組相較，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05).4).Western blot法檢測(cè)顯示:與陰性對(duì)照組相比，藥物作用后Bcl-2表達(dá)降低，Bax、 Caspase-3表達(dá)升高，Bcl-2/Bax比例減小。
　　結(jié)論：1.荷包牡丹堿在體外對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖與生長具有抑制作用。
　　2.荷包牡丹堿可促進(jìn)胃癌細(xì)胞的凋亡。
　　3.荷