食管鱗狀上皮癌變過程中間質(zhì)CAFs相關(guān)蛋白的表達及意義.pdf

1、目的：近來研究發(fā)現(xiàn)，上皮細胞的微環(huán)境-間質(zhì)在上皮腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中不只是被動旁觀者，還扮演著主動參與的作用，甚至是腫瘤的啟動者，其中間質(zhì)主要效應(yīng)細胞-纖維母細胞因其重要作用而備受關(guān)注。目前大量研究證實腫瘤間質(zhì)中存在一類活化的纖維母細胞，被稱為腫瘤相關(guān)纖維母細胞(carcinoma-associated-fibroblasts， CAFs)，通過分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1， TGF-

2、β1)和肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor, HGF)等因子促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展，人原始造血細胞抗原(hunman hematopoietic progenitor cell antigen， CD34)陰性、平滑肌肌動蛋白-α(Smooth muscle actin-α，αSMA)陽性是其主要辨認標志。
　　 食管癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病人數(shù)占世界50％以上，嚴重影響人民的生命健康，是我國

3、重點防治的惡性腫瘤。長期大量的研究逐步明確了食管鱗狀上皮癌變過程為正?！┣安∽儭缙诎M展期癌。對食管上皮癌變過程中腫瘤間質(zhì)微環(huán)境的研究，將有助于解析食管鱗狀上皮的癌變機制，有力推動食管癌的防治進程，但未見連續(xù)癌變過程中有關(guān)CAFs的報道。
　　 本研究觀察食管間質(zhì)纖維母細胞從正?！┣安∽儭缙诎M展期癌的癌變過程中α-SMA、CD34、TGF-β1及HGF的表達情況，探索間質(zhì)CAFs及其相關(guān)因子TGF-β1和HGF在食

4、管癌發(fā)生發(fā)展中的作用，并尋求潛在的具有臨床意義的診療指標，從而為食管癌的病因、診斷、治療和預后提供科學依據(jù)。
　　 方法：采用免疫組織化學(immunohistochemistry, IHC)鏈霉素親生物素-過氧化酶法(S-P法)檢測正常組、低級別上皮內(nèi)瘤變組（中度不典型增生）、高級別上皮內(nèi)瘤變組（重度不典型增生和原位癌）、早期癌組（粘膜癌）及進展期癌組共5組136例病例的食管組織中αSMA、CD34、TGF-β1及HGF表達情

5、況，并計數(shù)各組的微血管密度(microvascular density, MVD)，運用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1 αSMA在食管癌變過程中間質(zhì)纖維細胞的表達
　　 αSMA在正常食管組織纖維細胞無表達(0/20)，僅在肌細胞和血管壁平滑肌細胞中表達陽性。從低級別上皮內(nèi)瘤變到癌的各組中表達逐漸升高，至進展期癌組達最高，表達率為95.7％(22/23)。陽性細胞呈梭形，主要存在

6、于病變或癌巢周圍間質(zhì)中呈絲帶樣。結(jié)果顯示食管鱗狀上皮癌變過程中間質(zhì)纖維母細胞αSMA表達呈上升趨勢，其表達與患者性別、年齡無關(guān)，各組病例間質(zhì)纖維母細胞αSMA表達的陽性率有顯著性差異(x2=56.423，P=0.000)。
　　 2 CD34在食管癌變過程中間質(zhì)纖維細胞的表達
　　 CD34在正常食管間質(zhì)纖維細胞中陽性表達率為95.0％(19/20)，從低級別上皮內(nèi)瘤變到癌的各組中表達逐漸降低，在進展期癌組中CD34僅在

7、血管內(nèi)皮細胞呈陽性表達，在癌周圍間質(zhì)纖維細胞中不表達(0/23)。結(jié)果顯示食管鱗狀上皮癌變過程中間質(zhì)纖維母細胞CD34表達呈下降趨勢，其表達與患者性別、年齡無關(guān)，各組病例CD34表達的陽性率有顯著性差異(x2=51.977，P=0.000)。
　　 3 TGF-β1在食管癌變過程中上皮細胞和間質(zhì)纖維細胞的表達
　　 3.1 TGF-β1在上皮細胞中的表達
　　 TGF-β1在正常食管上皮細胞的表達率為5％(1/2

8、0);在低級別上皮內(nèi)瘤變組、高級別上皮內(nèi)瘤變組、早期癌組、進展期癌組的表達率分別為57.7％(15/26)、65.9％(29/44)、43.5％(10/23)、13.0％(3/23)。結(jié)果顯示食管鱗狀上皮癌變過程中上皮細胞的TGF-β1表達呈先升后降的趨勢，其中在高級別上皮內(nèi)瘤變組的表達達到峰值，其表達與患者性別、年齡無關(guān)，各組病例TGF-β1表達陽性率有顯著差異(x2=31.977，P=0.000)。
　　 3.2 TGF-β

9、1在間質(zhì)纖維母細胞中的表達
　　 TGF-β1在正常食管間質(zhì)中不表達(0/20)，在低級別上皮內(nèi)瘤變組、高級別上皮內(nèi)瘤變組、早期癌組、進展期癌組的表達率分別為3.8％(1/26)、20.5％(9/44)、34.8％(8/23)、60.9％(14/23)。結(jié)果顯示癌變過程中食管間質(zhì)TGF-β1表達呈上升趨勢，其表達與患者性別、年齡無關(guān)，各組病例TGF-β1表達的陽性率有顯著性差異(x2=31.425，P=0.000)。
　　

10、 4 HGF在食管癌變過程中間質(zhì)纖維母細胞的表達
　　 HGF在正常食管間質(zhì)中不表達(0/20)，在低級別上皮內(nèi)瘤變組、高級別上皮內(nèi)瘤變組、早期癌組、進展期癌組的表達率分別為3.8％(1/26)、28.5％(13/44)、39.1％(9/23)、56.5％(13/23)。結(jié)果顯示癌變過程中食管間質(zhì)HGF表達呈上升趨勢，其表達與患者性別、年齡無關(guān)，各組病例HGF表達的陽性率有顯著性差異(x2=26.817，P=0.000)。

11、r>　　 5 αSMA、CD34和TGF-β1在食管癌變過程間質(zhì)纖維細胞表達的相關(guān)性分析
　　 αSMA和CD34在食管各級別病變間質(zhì)纖維母細胞的陽性表達之間具有負相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)R=-0.762，P=0.000。αSMA和TGF-β1在食管各級別病變間質(zhì)纖維母細胞的陽性表達之間具有正相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)R=0.419，P=0.000。
　　 6 食管癌變過程各階段的微血管密度(microvascular density，

12、 MVD)
　　 正常食管MVD值為12.33±1.68，低級別上皮內(nèi)瘤變、高級別上皮內(nèi)瘤變、早期癌、進展期癌的MVD值分別為15.72±1.97、20.91±2.20、26.42±1.96、30.01±2.35。結(jié)果顯示癌變過程MVD值逐漸升高，5組的MVD值有顯著性差異(P=0.000)，且5組任意兩者之間兩兩比較均有顯著性差異(P=0.000)。MVD值大小與患者性別、年齡無關(guān)，但αSMA陽性組的MVD值明顯高于陰性組，間

13、質(zhì)TGF-β1陽性組的MVD值也明顯高于陰性組。
　　 結(jié)論：
　　 1 在食管鱗狀上皮從正?！┣安∽儭┑难葑冞^程中，間質(zhì)纖維母細胞向CAFs轉(zhuǎn)化增加，提示間質(zhì)CAFs可能參與上皮細胞惡性轉(zhuǎn)化、促進癌進展。
　　 2 推測CAFs通過分泌TGF-β1和HGF參與了食管鱗狀細胞癌的發(fā)生、發(fā)展等一系列過程。
　　 3 CAFs可能在癌前病變階段就促進微血管形成，并由此而促進食管的癌變和進展。