Mcm2蛋白在賁門癌變過程中的表達及其預(yù)后意義.pdf

1、背景：
　　微型染色體維持蛋白(minichromosome maintenance proteins,MCMs)是一蛋白家族,至少包括Mcm2~7等六個結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白。目前研究認為MCMs是真核細胞DNA復(fù)制前復(fù)合體的關(guān)鍵組分,是DNA復(fù)制所必需的。MCMs只存在于增殖細胞中,在分化細胞和靜止細胞中含量減少或消失,因此可以作為增殖細胞的特異標記。而腫瘤組織與正常組織細胞相比除形態(tài)學(xué)上的特征以外,在功能狀態(tài)上表現(xiàn)為控制細胞增殖的機制

2、失調(diào),具有很強的增殖能力。因此MCMs可以作為腫瘤細胞的特異標志和一些腫瘤病變的診斷工具。一系列包括宮頸、皮膚、食管、肺、腎臟等正常組織和腫瘤組織的Mcm2表達研究提示Mcm2可以作為一些腫瘤的細胞標記物,但Mcm2在賁門組織中的表達還缺乏系統(tǒng)的研究。
　　目的：
　　本研究檢測 Mcm2蛋白在正常賁門、單純性增生、非典型增生粘膜組織和癌組織中的表達規(guī)律及其與賁門癌臨床病理特征的關(guān)系,并與PCNA及Ki-67比較,探究Mcm

3、2蛋白作為新的增殖指標在賁門癌變過程中的早期診斷意義和對賁門癌患者預(yù)后評估中的作用。
　　材料：
　　1.賁門癌標本:180例賁門癌標本來自2000-2007年間汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室標本庫。其中133例有完整隨訪資料,5年及以上隨訪期的患者有126例,7例患者隨訪期少于5年,5年隨訪率94.7％。
　　2.賁門粘膜標本:賁門癌旁粘膜47例,包括17例單純性增生粘膜組織、30例非典型增生粘膜組織;另取10例非賁門疾

4、病死亡尸體解剖病例正常賁門粘膜組織作為對照。
　　方法：
　　1.免疫組織化學(xué)染色
　　Envision Labelled Peroxidase System(ELPS)二步法檢測Mcm2、Ki-67以及PCNA蛋白在賁門石蠟組織中的表達。
　　2.圖像分析法
　　應(yīng)用Leica IM50圖像采集系統(tǒng)和Image-Pro Plus6.0圖像分析系統(tǒng)對染色結(jié)果分析,計算每張切片的標記指數(shù)( labelling

5、 index, LI)。
　　結(jié)果：
　　1. Mcm2蛋白在賁門粘膜組織和癌組織中的表達:在正常的賁門、單純性增生粘膜上皮組織中,Mcm2蛋白表達局限于賁門腺體底部的下1/3至1/2部分的增生細胞,而間質(zhì)細胞和靠近胃腔表面的細胞未見染色。在非典型增生粘膜和癌組織中,Mcm2在整個上皮大量表達。從正?！鷨渭冃栽錾堑湫驮錾?Ki-67、Mcm2和PCNA的LI均逐漸增高,且其差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其中在癌

6、和非典型增生中,Mcm2的LI明顯高于其他二者,且其差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在正常賁門和單純性增生組織中,PCNA的標記指數(shù)高于Ki-67和Mcm2,但差別沒有統(tǒng)計意義(P>0.05)。
　　2. Mcm2在賁門粘膜非典型增生診斷的評價:敏感度為90.0%,特異度為63.0%,準確度為77.2%,陽性預(yù)測值為73.0%,陰性預(yù)測值為87.0%,優(yōu)于傳統(tǒng)的增殖指標PCNA和Ki-67,提示其對于癌前病變及早期癌的早期診斷

7、意義。
　　3. Mcm2蛋白的表達與賁門癌臨床病理特征之間的關(guān)系:Mcm2、Ki-67和PCNA均與年齡、性別、腫瘤大小、病理類型無顯著相關(guān),而三者與TNM分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。在各級賁門管狀腺癌標本中, Mcm2的LI隨著分化級別的降低而上升,各組之間的差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Ki-67的LI也隨著分化級別的降低而上升,但是各組之間的差別沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),PCNA的LI在中分化和低

8、分化賁門癌的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在高、中、低分化賁門管狀腺癌組內(nèi),Mcm2、Ki67和PCNA的差別均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。
　　4. Mcm2、PCNA和Ki-67表達對賁門癌預(yù)后的影響:Kaplan-Meier生存率曲線和Lon-rank test分析發(fā)現(xiàn),三者的低表達組患者(LI≤50%)的總生存率和無瘤生存率分別高于其相應(yīng)高表達組患者(LI>50%),提示Mcm2與Ki-67、PCNA的表達在賁門

9、癌術(shù)后的侵襲、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中可能發(fā)揮了重要作用。對可能影響賁門癌預(yù)后的性別、年齡、腫瘤最長徑、是否化療、浸潤深度(T分期)、淋巴轉(zhuǎn)移(N分期)及Mcm2、Ki-67和PCNA在賁門癌中的表達情況等多個因素進行Cox’s Regression分析,消除各因素間的相互影響。多因素 COX回歸分析結(jié)果顯示,臨床 TNM分期(P=0.000,OR=2.028)、Mcm2蛋白的表達(P=0.012,OR=3.421)、性別(P=0.014,OR=1

10、.901)和是否化療(P=0.018, OR=0.499)均為賁門癌術(shù)后生存期獨立的預(yù)后指標,臨床TNM分期晚、Mcm2蛋白在賁門癌中的高表達、沒有術(shù)后輔助化療的男性患者的術(shù)后生存期短。
　　結(jié)論：
　　1.Mcm2蛋白作為新的增殖指標對癌前病變及早期癌的具有早期診斷意義,且優(yōu)于 PCNA和Ki-67。
　　2.Mcm2對非典型增生診斷的敏感度、特異度、準確度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值均高于PCNA和Ki-67。