CyclinE、Survivin及HPV16-E6蛋白在宮頸上皮癌變過程中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于乳腺癌。宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)發(fā)展至宮頸癌是一個(gè)復(fù)雜而漫長(zhǎng)的過程，近年來宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的發(fā)病率有上升趨勢(shì)，尤其是年輕宮頸癌的發(fā)病率明顯升高。國(guó)際癌癥研究中心(IARC)專題討論會(huì)(1995年)明確提出人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素，分子機(jī)制研究表明，E6蛋白是HPV參與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的主要蛋白，E6通過與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子p53結(jié)合發(fā)揮其致癌作用，但從發(fā)病機(jī)制上看

2、，宮頸癌的發(fā)生還需要其他多方面因素的參與，如細(xì)胞周期紊亂，細(xì)胞凋亡機(jī)制的抑制等，其中調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的細(xì)胞周期蛋白E(CyclinE)與抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)的Survivin是目前研究的熱點(diǎn)。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞技術(shù)的方法檢測(cè)CyclinE、Survivin和HPV16-E6蛋白在正常宮頸組織、慢性宮頸炎癥組織、CIN組織、宮頸癌組織中的表達(dá)情況，研究它們與宮頸癌年齡、臨床分期、組織分化程度等臨床病理特征之間的關(guān)系，探討三者在宮頸癌

3、發(fā)病中的協(xié)同作用，為宮頸癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制提供新的思路，為宮頸癌早期診斷提供理論依據(jù)，也為宮頸癌的早期防治提供新靶點(diǎn)。 方法 1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)(IHC)S-P法檢測(cè)10例正常宮頸標(biāo)本、30例慢性宮頸炎標(biāo)本、24例CIN和48例宮頸癌標(biāo)本中CyclinE、Survivin和HPV16-E6蛋白的表達(dá)情況。 2.應(yīng)用流式細(xì)胞分析技術(shù)(FCM)的方法定量檢測(cè)10例正常宮頸標(biāo)本、12例慢性宮頸炎標(biāo)本、15例CIN和25

4、例宮頸癌標(biāo)本中CyclinE、Survivin、HPV16-E6的蛋白含量。 3.運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果: 1.在正常宮頸標(biāo)本、慢性宮頸炎標(biāo)本、CIN和宮頸癌標(biāo)本中CyclinE的陽性表達(dá)率整體上呈上升趨勢(shì)，四組比較有顯著性差異(x2=39.65)。正常組與慢性宮頸炎組比較，差異無顯著性；正常組與慢性宮頸炎組合并后分別與宮頸癌組及CIN組比較，差異均有顯著性；宮頸癌組與CIN組比較，差

5、異亦有顯著性。在宮頸癌中，CyclinE的表達(dá)與病理類型、組織學(xué)分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與年齡、腫瘤大小、宮旁浸潤(rùn)及浸潤(rùn)深度無關(guān)。 應(yīng)用FCM法檢測(cè)CyclinE在四組組織中細(xì)胞內(nèi)的蛋白含量，正常宮頸組、宮頸炎組、CIN組和宮頸癌組中表達(dá)量的FI值(-x±s)分別為0.98±0.06，1.00±0.04，1.40±0.12和1.68±0.15，依次上升，四組比較有顯著性差異(F=131.95)。組間比較顯示：Cycli

6、nE表達(dá)量在正常宮頸組和宮頸炎組間比較無顯著性差異，其余各組進(jìn)行兩兩比較均有顯著性差異。 2.Survivin在正常宮頸標(biāo)本、慢性宮頸炎標(biāo)本、CIN和宮頸癌標(biāo)本中的陽性表達(dá)率整體上呈上升趨勢(shì)，四組相比有顯著性差異。正常組與慢性宮頸炎組比較，差異無顯著性；合并正常組與慢性宮頸炎組后，宮頸癌組及CIN組分別與之比較，差異均有顯著性；宮頸癌組與CIN組比較，差異無顯著性。在宮頸癌組織中，Survivin的表達(dá)與年齡、病理類型、腫瘤大小

7、、宮旁或脈管浸潤(rùn)及浸潤(rùn)深度無關(guān)，與臨床分期和組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。應(yīng)用FCM法檢測(cè)Survivin在細(xì)胞內(nèi)的總含量，Survivin在正常宮頸組、宮頸炎組、CIN組和宮頸癌組中的蛋白表達(dá)量分別為0.99±0.09，1.03±0.02，1.33±0.03和1.93±0.24，四組比較差異有顯著性(F=121.24)。組間比較顯示Survivin表達(dá)量在正常宮頸組和慢性宮頸炎組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各組進(jìn)行兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

8、 3.HPV16-E6在正常宮頸標(biāo)本、慢性宮頸炎標(biāo)本、CIN和宮頸癌標(biāo)本中的陽性表達(dá)率整體上呈上升趨勢(shì)，四組比較有顯著性差異。正常組與慢性宮頸炎組比較，差異無顯著性；合并正常組與慢性宮頸炎組后，宮頸癌組及CIN組分別與之比較，差異均有顯著性；宮頸癌組與CIN組比較，差異無顯著性。在宮頸癌組中，HPV16-E6蛋白的表達(dá)與年齡及組織學(xué)類型有關(guān)，與分化程度、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及浸潤(rùn)深度無關(guān)。 應(yīng)用FCM法檢測(cè)HP

9、V16-E6在細(xì)胞內(nèi)的含量，在正常宮頸組、宮頸炎組、CIN組和宮頸癌組中的蛋白表達(dá)量分別為：0.96±0.08，1.02±0.02，1.35±0.14和1.43±0.16，四組比較有顯著性差異。組間比較顯示正常組與炎癥組比較無顯著性差異，CIN組與宮頸癌組比較無顯著性差異，其它組間比較均有顯著性差異。 4.應(yīng)用Spearman等級(jí)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌組織中，CyclinE與Survivin表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.4591)；Cy

10、clinE與HPV16-E6蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.522)；Survivin與HPV16-E6蛋白的表達(dá)亦呈正相關(guān)(r=0.404)。 結(jié)論: 1.CyclinE、Survivin及HPV16-E6蛋白在正常宮頸標(biāo)本、慢性宮頸炎標(biāo)本、CIN和宮頸癌標(biāo)本中的表達(dá)呈依次升高趨勢(shì)。它們的異常表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。聯(lián)合檢測(cè)三者可能有助于宮頸癌的早期診斷。 2.CyclinE表達(dá)與宮頸癌的臨床分期、病理類型

11、、組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，Survivin表達(dá)與宮頸癌的臨床分期、組織分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示它們可能是預(yù)測(cè)宮頸癌侵襲性及預(yù)后的有效監(jiān)測(cè)指標(biāo)。 3.HPV16-E6蛋白高表達(dá)多見于45歲以下宮頸癌患者，且與宮頸鱗癌的發(fā)生有關(guān)，提示檢測(cè)HPV16感染有助于45歲以下女性宮頸鱗癌的篩查。 4.實(shí)驗(yàn)表明CyclinE、Survivin、HPV16-E6在宮頸癌中的表達(dá)兩兩均呈正相關(guān)，提示三者可能在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中