宮頸上皮癌變過(guò)程中COX-2、HPV16-E6蛋白的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的： 宮頸癌是全球婦女中最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，占女性生殖器官惡性腫瘤的首位。宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervicalintraepithelial neoplasia，CIN)發(fā)展至宮頸癌需經(jīng)歷很長(zhǎng)一段時(shí)間，晚期及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移病例預(yù)后差。近年來(lái)宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的發(fā)病率有上升趨勢(shì)，尤其是年輕宮頸癌的發(fā)病率明顯升高。普遍認(rèn)為HPV癌蛋白(E6、E7)在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中起主要作用。高危型HPV16編碼的E6蛋白與P53蛋白結(jié)合，使其失活

2、，導(dǎo)致細(xì)胞增殖。E7蛋白可致細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)。E6可增加E7基因轉(zhuǎn)化上皮細(xì)胞的能力。但研究表明單一HPV感染不足以形成CIN或?qū)m頸癌，不能忽視其他協(xié)同因素。環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)是20世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)的一種與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的酶。給予特異性COX-2抑制劑可降低某些腫瘤的發(fā)病。研究表明，COX-2表達(dá)上調(diào)及HPV感染都是宮頸癌發(fā)病的早期事件。本實(shí)驗(yàn)以免疫組化方法檢測(cè)了HPV16-E6蛋白及CO

3、X-2在宮頸慢性炎、CIN、浸潤(rùn)癌各組中的表達(dá)情況及二者的相關(guān)性，以及二者與宮頸癌年齡、分期、分化等臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。探討HPV16-E6、COX-2在宮頸癌發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用，為COX-2抑制劑和HPV疫苗在宮頸癌防治中的治、療應(yīng)用提供有力的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法： 本研究標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2004年6月-2006年6月間就診于婦科、初診的宮頸癌患者45例，術(shù)后均經(jīng)病理確診，病歷資料完整。其

4、中鱗癌36例，腺癌6例，腺鱗癌及透明細(xì)胞癌3例。根據(jù)國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2000)標(biāo)準(zhǔn)分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期17例，Ⅲ期3例。選擇同期因婦科良性疾病手術(shù)治療或門診治療患者的正常宮頸組織21例，宮頸慢性炎癥73例，CIN26例。病歷資料完整。所有標(biāo)本于離體半小時(shí)內(nèi)取材，以10％中性甲醛固定，石蠟包埋，切片備用。應(yīng)用免疫組化S-P法檢測(cè)COX-2和HPV16-E6蛋白在不同宮頸病變組織中的表達(dá)情況及其與宮頸癌臨床病理特征之間的關(guān)系，分

5、析二者之間的相關(guān)性。應(yīng)用SAS8.1統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)，采用X<'2>檢驗(yàn)、確切概率法、多個(gè)樣本率比較的X<'2>分割法、Spearman等級(jí)相關(guān)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1 COX-2在不同宮頸病變組織中的表達(dá)：在正常宮頸、宮頸炎、CIN、宮頸癌各組中，COX-2的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0％、36.99％、38.46％、64.44％，四組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X<'2>=25.50，P<0.0001)。經(jīng)X<'2>分割后比較

6、(α'=0.008333)，宮頸癌組的陽(yáng)性率明顯高于宮頸炎組及正常宮頸組，有顯著性差異(分別為X<'2>=8.42，P=0.0037；X<'2>=24.14，P<0.0001)。CIN組明顯高與正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=8.09，P=0.0044)。宮頸炎組明顯高于正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=10.89，P=0.001)。 2 HPV16-E6蛋白在不同宮頸病變組織中的表達(dá)：在正常宮頸、宮頸炎、CIN、宮頸

7、癌各組中，HPV16-E6蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0.5％、38.35％、46.15％、71.11％，四組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X<'2>=27.50，P<0.0001)。經(jīng)X<'2>分割后比較(α'=0.008333)，宮頸癌組的陽(yáng)性率明顯高于宮頸炎組及正常宮頸組，有顯著性差異(分別為X<'2>=11.95，P=0.0005；X<'2>=25.21．P<0.0001)。CIN組明顯高與正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=9.95，P=

8、0.0016)。宮頸炎組明顯高于正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=8.63，P=0.0033)。 3 COX-2的表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：COX-2的陽(yáng)性表達(dá)率在<45歲和≥45歲患者中分別為57.69％、73.68％，二者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=1.22，P>0.05)；在鱗癌、腺癌及其他病理類型中分別為67.65％、62.5％、33.3％，三者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=1.43，P>0.05)；在高分化、中

9、分化、低分化組織中分別為75.0％、65.0％、53.85％，三者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=1.22，P>0.05)；在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中分別為60.0％、70.59％、66.67％，三者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=0.05，P>0.05)；腫瘤直徑<4cm和≥4cm分別為68.75％、53.85％，二者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=0.36，P>0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者分別為85.0％、48.0％，二者相比有顯著

10、性差異(X<'2>=6.63，P<0.05)；有宮旁或脈管浸潤(rùn)與無(wú)宮旁或脈管浸潤(rùn)的組織中分別為78.95％、53.85％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=4.60，P<0.05)；淺肌層和深肌層浸潤(rùn)分別為50.0％、84.21％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=5.60，P<0.05)。 4 HPV16-E6蛋白的表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：陽(yáng)性表達(dá)率在高分化、中分化、低分化組織中分別為83.33％、70.0％、61

11、.54％，三者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=1.46，P>0.05、)；在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中分別為68.0％、76.47％、66.67％，三者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=0.39，P>0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者分別為65.0％、76.0％，二者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=0.65，P>0.05)；腫瘤直徑<4cm和≥4cm分別為78.13％、53.85％，二者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=1.60，P>0.05)；淺肌

12、層和深肌層浸潤(rùn)分別為69.23％、73.68％，二者相比無(wú)顯著性差異(X<'2>=0.11，P>0.05)；在<45歲和≥45歲患者中分別為57.65％、89.47％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=5.39，P<0.05)；在鱗癌與非鱗癌中分別為88.24％、18.18％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=16.59，P<0.05)；有宮旁或脈管浸潤(rùn)與無(wú)宮旁或脈管浸潤(rùn)的組織中分別為89.47％、57.69％，二者相比有顯著性差異(X

13、<'2>=5.40，P<0.05)。 5 COX-2和HPV16-E6蛋白在不同宮頸病變組織中表達(dá)的相關(guān)性：在宮頸炎組、宮頸癌組，COX-2和HPV16-E6蛋白的表達(dá)均呈正相關(guān)關(guān)系，等級(jí)相關(guān)系數(shù)r<,s>及P值分別為(r<,s>=0.7794，P<0.01)，(r<,s>=0.6014，P<0.01)。 結(jié)論： 1 COX-2和HPV16-E6蛋白在宮頸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于慢性宮頸炎組及正常宮頸組，表明COX-

14、2和HPV16-E6蛋白與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展及惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)。CIN及宮頸炎組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組，表明在宮頸癌變發(fā)生早期即有COX-2和HPV16-E6蛋白水平的升高，提示：COX-2和HPV16-E6蛋白表達(dá)上調(diào)是宮頸癌發(fā)病的早期事件，檢測(cè)二者在宮頸組織中的表達(dá)有助于早期診斷宮頸癌前病變及早期浸潤(rùn)癌。 2 COX-2和HPV16-E6蛋白與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：COX-2與宮頸癌發(fā)病年齡、病理類型

15、、分化程度分期、腫瘤直徑無(wú)關(guān)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或脈管浸潤(rùn)及浸潤(rùn)深度有關(guān)。HPV16-E6蛋白與宮頸癌發(fā)病年齡、病理類型、宮旁或脈管浸潤(rùn)有關(guān)，而與組織分化程度、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑及浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)。表明：COX-2在宮頸癌發(fā)生發(fā)展及演進(jìn)整個(gè)過(guò)程均發(fā)揮作用，檢測(cè)COX-2還可作為反映宮頸癌惡性程度及侵襲轉(zhuǎn)移能力的指標(biāo)。高危型HPV16感染引起的宮頸癌多發(fā)生在年齡較大人群(≥45歲)，且與宮頸鱗癌的關(guān)系較其他病理類型更加密切。HPV1