大鼠牙根發(fā)育模式相關(guān)基因的篩選及部分基因功能的研究.pdf

1、 本研究目的是利用大鼠下頜磨牙和切牙具有完全不同的牙根發(fā)育模式作為動(dòng)物模型，對牙根發(fā)育相關(guān)的差異表達(dá)基因進(jìn)行篩選并對部分差異基因的功能進(jìn)行探討，為牙根發(fā)育及牙根再生研究提供理論依據(jù)。 本課題采用組織學(xué)、免疫組織化學(xué)、改良消減雜交技術(shù)、Northern blot、Western blot、RT-PCR、Real-time PCR、細(xì)胞培養(yǎng)、基因轉(zhuǎn)染和RNA干擾等方法，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。通過組織學(xué)觀察大鼠下頜第一磨牙和下

2、頜切牙的發(fā)育時(shí)序，建立了大鼠牙根發(fā)育啟動(dòng)相關(guān)差異表達(dá)基因文庫，為進(jìn)一步篩選牙根發(fā)育模式相關(guān)基因奠定了基礎(chǔ)。 采用特異的引物通過RT-PCR的方法進(jìn)行差異基因NfiC的克隆，結(jié)果意外的發(fā)現(xiàn)在大鼠磨牙胚發(fā)育中至少存在3種NfiC基因選擇性剪接體，并通過T-A克隆獲得剪接體的克隆，為進(jìn)一步研究NfiC基因在磨牙牙根發(fā)育中的作用提供了新思路。 針對Sel1L基因的RNA干擾載體，通過RT-PCR及Western Bl