脂肪細(xì)胞共培養(yǎng)對(duì)肝細(xì)胞表達(dá)ABCA1、ABCG1的影響及機(jī)制探討.pdf

1、背景：肥胖是代謝綜合征的重要成分,其主要血脂改變是TG升高與HDL-C降低,其中低HDL-C與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系最為密切。臨床中我們觀察到:在肥胖合并肝臟脂肪組織侵潤(rùn)(如脂肪肝)時(shí)HDL-C降低更為突出,提示脂肪組織對(duì)肝臟的HDL代謝有直接或間接的影響。但肥胖導(dǎo)致低HDL-C的機(jī)制仍未完全明確。
　　目的：建立脂肪細(xì)胞與肝細(xì)胞共培養(yǎng)模型,探討促分化成熟脂肪細(xì)胞對(duì)肝細(xì)胞表達(dá)ABCA1、ABCG1的影響。
　　方法：培養(yǎng)3T3-

2、L1前體脂肪細(xì)胞,促分化至完全成熟(第8天),將HepG2細(xì)胞分別與未促分化3T3及促分化3T3共培養(yǎng)48小時(shí),分別標(biāo)記為促分化3T3組及3T3組,將單獨(dú)培養(yǎng)的HepG2設(shè)為正常對(duì)照組,提取三組HepG2細(xì)胞的蛋白及RNA,通過免疫印跡(Western Blot)方法檢測(cè)三組肝細(xì)胞ABCA1、ABCG1蛋白表達(dá)量。以及半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)三組肝細(xì)胞ABCA1、ABCG1、LXRα及SREBP1c mRNA的表達(dá)

3、。
　　結(jié)果：1.與正常對(duì)照及3T3組相比,促分化3T3組肝細(xì)胞ABCA1蛋白水平分別下降83％(P<0.05)和80%(P<0.05),而mRNA水平則分別下降30%(P<0.05)和26%(P<0.05)。而3T3組與對(duì)照組相比蛋白和RNA水平分別下降12.5%(P>0.05)和4%(P>0.05)。2.與正常對(duì)照及3T3組相比,促分化3T3組肝細(xì)胞ABCG1蛋白水平分別下降34%(P<0.05)和30%(P<0.05),而m

4、RNA水平則分別下降41%(P<0.05)和36%(P<0.05)。而3T3組與對(duì)照組相比蛋白和RNA水平均下降7%(P>0.05)。3.與正常對(duì)照及3T3組相比,促分化3T3組肝細(xì)胞LXRαmRNA水平分別下降54%(P<0.05)和51%(P<0.05)。而3T3組與對(duì)照組相比RNA水平下降4.8%(P>0.05)。4.與正常對(duì)照及3T3組相比,促分化3T3組肝細(xì)胞SREBP1cmRNA分別上調(diào)73%(P<0.05)和62.5%(P