TNF-α對(duì)巨噬細(xì)胞源泡沫細(xì)胞ABCA1表達(dá)的影響.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化(Artherosclerosis，AS)作為一種慢性炎癥性疾病，已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)死亡率最高的疾病之一。巨噬細(xì)胞能啟動(dòng)脂質(zhì)條紋形成，在動(dòng)脈粥樣硬化病理過(guò)程中具有重要作用。脂質(zhì)條紋主要由巨噬細(xì)胞源泡沫細(xì)胞構(gòu)成，而巨噬細(xì)胞泡沫化則是由胞內(nèi)脂質(zhì)代謝及轉(zhuǎn)運(yùn)紊亂導(dǎo)致。巨噬細(xì)胞膽固醇穩(wěn)態(tài)的調(diào)控涉及多種因子，包括清道夫受體、參與膽固醇代謝的酶類以及膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，如 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ABCA1、ABCG1和ABCG4等)和清道夫受

2、體 B1(scavenger receptor B1，SR-B1)。巨噬細(xì)胞質(zhì)膜上的清道夫受體包括清道夫受體 A(scavenger receptor A，SR-A)和CD36，他們可以介導(dǎo)修飾脂質(zhì)特別是氧化 LDL(ox-LDL)的攝取。ox-LDL在溶酶體中降解為游離膽固醇或被修飾成無(wú)活性的膽固醇酯。ABCA1能夠?qū)麅?nèi)過(guò)剩的游離膽固醇傳遞給 apoA-I或 apoE，從而促進(jìn)膽固醇外流，抑制巨噬細(xì)胞泡沫化。增加 ABCA1的表達(dá)具

3、有抗 AS作用。近幾年研究顯示，過(guò)氧化物酶體增殖激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ，PPARγ)和核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)在調(diào)控巨噬細(xì)胞炎癥和膽固醇穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮著重要作用。作為一種重要的炎癥因子，腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)很可能具有調(diào)控泡沫細(xì)胞 ABCA1表達(dá)的功能。
　　本實(shí)驗(yàn)

4、主要研究促炎因子 TNF-α對(duì)ABCA1表達(dá)的調(diào)控作用，并且闡述 PPARγ與NF-κB之間是否存在相互作用、參與 TNF-α對(duì)ABCA1表達(dá)的調(diào)控。分離并純化 TNF-α-/-型和野生型(WT型)C57BL/6J小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，與50μg/ml ox-LDL孵育48h以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞泡沫化。實(shí)驗(yàn)分為兩組對(duì)照組，一組泡沫細(xì)胞僅添加外源 TNF-α(10ng/ml)處理24h，另一組使用ox-LDL(50μg/ml)和TNF-α(10ng

5、/ml)共同處理24h。應(yīng)用熒光免疫組織化學(xué)方法研究TNF-α對(duì)巨噬細(xì)胞源泡沫細(xì)胞內(nèi) ABCA1表達(dá)的影響，以及該過(guò)程可能涉及的信號(hào)通路間的相互作用。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:未泡沫化前，TNF-α-/-型小鼠腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi) ABCA1表達(dá)量極少，與WT型無(wú)明顯差別。加入 ox-LDL誘導(dǎo)泡沫化后，ABCA1表達(dá)量明顯增加，但兩種基因型之間無(wú)明顯差別。在泡沫細(xì)胞中加入外源 TNF-α后，ABCA1表達(dá)量明顯下降，因而推測(cè) TNF-α對(duì)A

6、BCA1表達(dá)的抑制作用與 TNF-α濃度相關(guān)。巨噬細(xì)胞 NF-κB的表達(dá)量在泡沫化后無(wú)顯著增加，向泡沫細(xì)胞中添加 TNF-α可激活 NF-κB核易位，ox-LDL對(duì)NF-κB核易位也有一定刺激作用。ox-LDL可刺激 PPARγ的表達(dá)和核易位，并且這種作用與時(shí)間呈正相關(guān)；TNF-α對(duì)泡沫細(xì)胞 PPARγ的激活有一定抑制作用，但并不顯著。
　　TNF-α可通過(guò)激活 NF-κB通路顯著降低泡沫細(xì)胞中ABCA1表達(dá)水平，但 PPARγ并