EGCG對THP-1源性泡沫細(xì)胞ABCA1的影響及其機(jī)制.pdf

1、目的：ABCA1在促進(jìn)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)和抗動脈粥樣硬化中發(fā)揮重要作用。EGCG是一種綠茶提取物，具有抗炎和調(diào)控脂代謝的藥理作用。以往的研究中發(fā)現(xiàn)SREBP-1c、apoB和LDLR等脂代謝相關(guān)蛋白參與了EGCG調(diào)控脂代謝及其抗炎作用。但是EGCG對ABCA1的作用尚不清楚。在我們的研究中，我們用TNF-α處理THP-1源性泡沫細(xì)胞，觀察EGCG預(yù)處理對ABCA1及其膽固醇流出影響及其機(jī)制。
　　方法：我們首先用PMA誘導(dǎo)THP-1細(xì)

2、胞貼壁形成巨噬細(xì)胞，加入OX-LDL形成泡沫細(xì)胞。在加入TNF-α(10 ng/ml)前，分別用不同濃度的(0,10,20,40,80μg/mL)EGCG處理泡沫細(xì)胞，然后收集細(xì)胞進(jìn)行實驗。膽固醇流出實驗和油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出和脂質(zhì)蓄積情況。實時定量 PCR觀察 ABCA1和LXRα/βmRNA水平。熒光素酶報告基因分析ABCA1啟動子活性。Western blot檢測ABCA1、LXRα/β、NF-κB p65, Nrf2,

3、 Keap1和IKKβ蛋白水平。EMSA檢測NF-κB和Nrf2的DNA結(jié)合活性。用siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞沉默NF-κB和Nrf2.
　　結(jié)果：實驗結(jié)果表明，TNF-α處理細(xì)胞能夠?qū)е翧BCA1mRNA表達(dá)水平啟動子活性降低，以及膽固醇流出水平降低，而EGCG預(yù)處理能夠衰減TNF-α這一作用。EGCG通過抑制NF-κB途徑來衰減TNF-α對細(xì)胞毒性作用，而不是通過激活LXR途徑。在抑制NF-κB過程中，EGCG激活了Nrf2/Keap