雌激素干預體外培養(yǎng)肝細胞對膽酸分泌及ABCG5和ABCG8表達的影響.pdf

1、目的:
　　 研究雌二醇(E2)對體外培養(yǎng)人胎肝細胞株(L-02)，膽汁酸分泌及三磷酸腺苷結合盒轉運體G5(ABCG5)和三磷酸腺苷結合盒轉運體G8(ABCG8)表達的影響。探討雌激素對ABCG5和ABCG8表達的影響在妊娠期肝內膽汁淤積癥中的作用。
　　 方法:
　　 應用雌激素作用于體外培養(yǎng)的人胎肝細胞，用ELISA法檢測不同濃度雌激素與肝細胞培養(yǎng)不同時間后培養(yǎng)基上清液中膽汁酸(TBA)的含量，并應用Real

2、-TimePCR測定肝細胞ABCG5mRNA和ABCG8mRNA表達量。
　　 結果:
　　 1.對照組與體外肝細胞培養(yǎng)8h、24h后，TBA分泌水平分別為(5.92±0.65)、(6.25±0.21)umol/L;肝細胞ABCG5mRNA表達量分別為(1.76±0.08)、(1.78±0.24);肝細胞ABCG8mRNA表達量分別為(1.73±0.46)、(1.79±0.06)。TBA水平、肝細胞ABCG5mRNA和A

3、BCG8mRNA表達量，8h與24h比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2.雌激素濃度為10nmol/L與體外肝細胞培養(yǎng)8h、24h后，TBA分泌水平分別為(5.89±0.82)、（6.18±0.13）umol/L;ABCG5mRNA表達量分別為(1.77±0.56)、(1.72±0.3);ABCG8mRNA表達量分別為(1.73±0.32)、（1.76±0.21）。隨著雌激素作用時間的延長，TBA水平、肝細胞AB

4、CG5mRNA和ABCG8mRNA表達量，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3.雌激素濃度為100nmol/L與體外肝細胞培養(yǎng)8h、24h后TBA分泌水平分別為(5.72±0.58)、(5.78±0.45)umol/L;ABCG5mRNA表達量分別為(1.69±0.27)、(1.58±0.32);ABCG8mRNA表達量分別為(1.66±0.44)、(1.44±0.15)。隨著雌激素作用時間的延長，TBA水平有升高趨勢

5、，而肝細胞ABCG5mRNA和ABCG8mRNA表達量有降低趨勢，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4.雌激素濃度為500nmol/L與體外肝細胞培養(yǎng)8h、24h后TBA分泌水平分別為(5.32±0.39)、(5.49±0.09)umol/L;肝細胞ABCG5mRNA表達量分別為(1.36±0.56)、(1.33±0.07);肝細胞ABCG8mRNA表達量分別為（1.57±0.27）、（0.95±0.02）。隨著雌激素

6、作用時間的延長，TBA水平有升高趨勢，而肝細胞ABCG5mRNA和ABCG8mRNA表達量有降低趨勢，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 5.雌激素濃度分別為0、10、100、500nmol/L時與體外肝細胞培養(yǎng)8h及24h時后，肝細胞TBA分泌水平及肝細胞ABCG5mRNA表達量和ABCG8mRNA表達量，隨著雌激素濃度的升高有逐漸降低趨勢，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。但是，當雌激素濃度為10nmol/L時與對

7、照組比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。雌激素濃度為100nmol/L和500nmol/L時分別與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)
　　 結論:
　　 1.低濃度雌激素不影響體外培養(yǎng)肝細胞TBA的分泌水平及ABCG5mRNA和ABCG8mRNA的表達。
　　 2.當雌激素濃度達到一定水平時，肝細胞TBA分泌水平隨著雌激素濃度的增加有逐漸減少趨勢，隨著作用時間延長有逐漸增加趨勢;而肝細胞ABCG