bFGF聯(lián)合妥布霉素地塞米松治療大鼠角膜堿燒傷的效果觀察.pdf

1、角膜損傷是獸醫(yī)臨床常見的眼科疾病之一，該病可造成角膜感染、混濁及新生血管，形成瘢痕，使透明度下降，嚴(yán)重者引起角膜潰瘍，繼而穿孔。若治療不當(dāng)，部分疾病還可繼發(fā)前葡萄膜炎、青光眼、白內(nèi)障等。本試驗(yàn)使用大鼠建立角膜堿燒傷模型，模擬動物角膜損傷的臨床特點(diǎn)，聯(lián)合使用堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、地塞米松(DXM)、妥布霉素(TOB)點(diǎn)眼治療，通過對大鼠角膜缺損、角膜混濁度、新生血管的臨床評分和病理組織學(xué)觀察，評價聯(lián)合用藥對角膜損傷的治療效果

2、，為動物角膜疾病的臨床診斷和治療提供資料。
　　選取健康Wistar大鼠55只，體重200-250g，將直徑4mm的圓形濾紙片用1 mol/L NaOH溶液浸濕，置于角膜中央，1min后取走濾紙片，并用無菌生理鹽水洗除角膜表面多余液體，制成大鼠角膜堿燒傷模型。將堿燒傷模型大鼠隨機(jī)分為五組:A組為堿燒傷組(n=20)，B組使用bFGF(n=20)，TB組為TOB與bFGF聯(lián)合用藥(n=20)，TD組為TOB與DXM聯(lián)合用藥(n=20

3、)，TDB組為bFGF、TOB與DXM聯(lián)合用藥(n=20)。A組不予用藥;B組點(diǎn)眼治療，3次/日，1滴/次;TB、TD、TDB組每種藥間隔1h點(diǎn)眼1次，3次/日，1滴/次。每組于造模后第1、3、7、14、21和35天用眼壓計測量眼內(nèi)壓，用裂隙燈顯微鏡觀察大鼠角膜水腫、新生血管及上皮修復(fù)的情況并記錄評分。分別在造模后第3、7、14和35天采集大鼠角膜，進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。結(jié)果如下:
　　(1)大鼠角膜堿燒傷后，可見角膜水腫、混濁，透

4、明度下降，但虹膜紋理可見。病理組織學(xué)觀察顯示:損傷區(qū)域的角膜上皮細(xì)胞完全缺失，基質(zhì)層間隙增大，膠原纖維排列紊亂，基質(zhì)層與內(nèi)皮層分離。
　　(2)大鼠角膜混濁度比較:用藥后第1天，TDB組與其他組相比其混濁度最低，且在第1天和3天時顯著低于A組（P＜0.01）;第7天時，TDB組混濁度極顯著低于A組（P＜0.01），與TD組相比沒有顯著性差異（P＞0.05）;第14天時，TDB組均顯著低于A、B組(P＜0.01)和TB組（P＜0.0

5、5），但與TD組無顯著性差異(P＞0.05)。
　　(3)大鼠角膜新生血管比較:治療后第1天，各組角膜均無新生血管形成;第3天時，角膜上出現(xiàn)新生血管，TDB組明顯少于A組和B組(P＜0.01)，但與TB組、TD組無顯著性差異（P＞0.05）;第7天時，TDB組明顯少于A組、B組和TB組（P＜0.01），但與TD組無顯著性差異;第14天時，TDB組也明顯少于A組、B組和TB組(P＜0.01)，但與TD組無顯著性差異（P＞0.05）。

6、
　　(4)大鼠角膜缺損率比較:治療后第1天，各組之間無統(tǒng)計學(xué)差異。第3天時，TDB組角膜缺損率顯著低于A組（P＜0.01），但與B組、TB組和TD組均無顯著性差異(P＞0.05);第7天時，TDB組與其他4組均無顯著性差異(P＞0.05);治療第14天，TDB組角膜缺損率顯著低于TD組(P＜0.01)，但與A組、B組和TB組無顯著性差異（P＞0.05）。
　　(5)大鼠眼內(nèi)壓比較:治療第1天時，TDB組與正常眼壓無顯著性差

7、異(P＞0.05);第3、7天時，TDB組高于正常眼壓，但無顯著性差異(P＞0.05);第14、21天時，TDB組低于正常眼壓，但無顯著性差異(P＞0.05);第35天時，TDB組低于正常眼壓，呈極顯著差異(P＜0.01)。
　　(6)大鼠角膜病理組織學(xué)觀察顯示:治療第3天時，TDB組角膜上皮細(xì)胞愈合1-2層，細(xì)胞形態(tài)基本完整，上皮層和基質(zhì)層連接處不平整，排列稍許紊亂，但細(xì)胞之間緊密相聯(lián)，未見明顯間隙與裂痕，炎性細(xì)胞少;A組上皮細(xì)

8、胞缺失，基質(zhì)細(xì)胞向缺損部位填補(bǔ)，損傷邊緣的角膜上皮層水腫，有大泡狀病變，基質(zhì)層間隙增大，排列紊亂，有大量的炎性細(xì)胞浸潤。第7天時，TDB組角膜上皮細(xì)胞愈合2-3層，細(xì)胞形態(tài)趨向完整，上皮層與基質(zhì)層連接處相對平整，基質(zhì)層未見炎性細(xì)胞浸潤;A組上皮層缺失，炎性細(xì)胞分布于膠原纖維間隙，基質(zhì)層上部出現(xiàn)滲出物。第14天時，TDB組上皮增生為5-6層，但在上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)和最外層出現(xiàn)空泡樣變化，細(xì)胞連接不緊密，基質(zhì)層間隙增大，但未見炎性細(xì)胞浸潤和紅

9、細(xì)胞;A組角膜上皮層愈合不均，基質(zhì)層間有大量新生血管和成熟紅細(xì)胞，膠原纖維排列紊亂。第35天時，TDB組角膜上皮的層數(shù)變少，上皮層內(nèi)有空泡樣變化，基質(zhì)層間隙大，膠原纖維排列紊亂，間隙內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤;A組角膜上皮已基本愈合，呈4-5層，角膜基質(zhì)層出現(xiàn)大量炎性細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，間隙有新生血管和成熟紅細(xì)胞。
　　綜上所述，bFGF、DXM和TOB聯(lián)合使用7天可抑制角膜炎性反應(yīng)，減輕角膜水腫程度，減少新生血管的形成，促進(jìn)角膜堿燒傷的愈合