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1、堿燒傷后角膜修復(fù)的初步研究摘要l/角膜是眼球最前端的圓盤狀無血管薄膜。組織學(xué)上可以把角膜由外向內(nèi)焱為五層,其中最外層即上皮層。作為眼球的屈光系統(tǒng)成分之一,角膜是眼的主要反射界面。角膜的高透明度是抑制光線散射、保持健康視力的重要基礎(chǔ)。近年來,隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)建設(shè)的深入進(jìn)行,角膜化學(xué)燒傷特別是堿燒傷的危害日益突出。盡管臨床上最有效的治療手段是角膜移植,但和治療其它角膜病變的移植相比,堿燒傷條件下的成功率是最低的。而且角膜供體和受體需求嚴(yán)
2、重失衡的矛盾以及組織工程化角膜進(jìn)程的緩慢都不同程度地阻礙著角膜移植手術(shù)的開展。因此,深入開展角膜堿燒傷條件下的組織修復(fù)研究是十分必要的,特別是結(jié)合與角膜移植和組織工程效果密切相關(guān)的角膜緣的研究。正常情況下角膜上皮具有很強(qiáng)的再生能力,這和角膜緣上皮基底層存在著角膜干細(xì)胞有關(guān),角膜干細(xì)胞是角膜上皮細(xì)胞增殖和分化的源泉。但在遭受化學(xué)燒傷特別是堿燒傷后,由于復(fù)雜的病理過程和持續(xù)的損傷作用,往往導(dǎo)致不同部位損傷后的關(guān)這方面的研究還少有報道和效果有
3、所不同。然而迄今為止,有本課題立足于系統(tǒng)研究角度,以新西蘭大白兔和合法渠道獲得的人類胚胎的新鮮角膜為主要實驗材料,以角膜緣和中央角膜為具體研究對象,結(jié)合離體和在體研究,從細(xì)胞培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)、PA/PAI級聯(lián)研究和應(yīng)激基因篩選等三個方面探討角膜堿燒傷條件下的組織修復(fù)規(guī)律以及角膜干細(xì)胞在創(chuàng)傷愈合中的作用。一、角膜緣和中央角膜在堿燒傷后修復(fù)過程中的細(xì)胞培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)研初步鑒定。所采用的實驗方法是SSH、細(xì)胞培養(yǎng)、RTPCR、分子克隆以及生物信息學(xué)
4、等相關(guān)技術(shù)。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)兔角膜緣堿燒傷后差異表達(dá)的應(yīng)激調(diào)控基因片段5條,其中上調(diào)基因片段3條,下調(diào)基因片段2條,己通過初步鑒定,并進(jìn)行了GeneBank登錄。其中新l號樣品可能是TSP家族中TSP2系列的新成員,推測和堿燒傷條件下角膜干細(xì)胞的原始應(yīng)激產(chǎn)物有關(guān)。實驗結(jié)果還提示,TsP2在堿燒傷后組織修復(fù)過程中的作用應(yīng)該得到重視和進(jìn)一步研究。y,關(guān)鍵詞:角膜角膜緣角膜干細(xì)胞堿燒傷修復(fù)細(xì)胞培、/kr~/、/xv養(yǎng)及形態(tài)學(xué)PA/PAI級聯(lián)SSH
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