新型角膜上皮細(xì)胞載體促進(jìn)角膜堿燒傷修復(fù)的作用研究.pdf

1、目的：評(píng)價(jià)羧甲基殼聚糖（Carboxymethyl chitosan，CMCTS）共混膜片的理學(xué)及生物學(xué)性能，并研究其在角膜堿燒傷修復(fù)中的作用。
　　方法：將CMCTS與明膠（Gelatin，Gel）和透明質(zhì)酸（Hyaluronic acid，HA）按照20∶1∶2的比例制備CMCTS共混膜片，使用全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀于400～800 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)該膜片的透光性；將膜片植入大鼠皮下及肌肉組織，組織切片HE染色評(píng)價(jià)其組織相容性和炎癥反應(yīng)；

2、通過大鼠肝臟和腎臟的體重質(zhì)量比評(píng)估膜片在體內(nèi)的降解毒性。將兔原代角膜上皮細(xì)胞接種于CMCTS共混膜片上構(gòu)建角膜上皮細(xì)胞移植體，CFSE染色和掃描電鏡觀察細(xì)胞在膜片上的活性和生長(zhǎng)狀態(tài)；將該細(xì)胞移植體用于新西蘭大白兔角膜堿燒傷眼表的治療，通過外眼相觀察、裂隙燈觀察和組織免疫熒光染色與空白對(duì)照組、模型組及沒有細(xì)胞移植的膜片組相比較，評(píng)價(jià)其修復(fù)效果。
　　結(jié)果：本研究制備的CMCTS共混膜片在400～800 nm波長(zhǎng)下透光率均高于80%；

3、大鼠肌肉及皮下植入膜片2 w后，組織切片HE染色可見周圍組織炎癥反應(yīng)基本消失；膜片在皮下及肌肉組織中能夠穩(wěn)定降解，在皮下組織中降解時(shí)間超過8 w，而在肌肉組織中4 w完成降解；膜片在降解過程中對(duì)肝、腎均無明顯毒性；CFSE染色和掃描電鏡觀察兔原代角膜上皮細(xì)胞能夠在膜片上貼附生長(zhǎng)并連接成片；將其移植到角膜堿燒傷的兔眼表，發(fā)現(xiàn)其在術(shù)后30 d內(nèi)基本完成創(chuàng)面修復(fù)，而單純膜片組的修復(fù)能力較弱，模型組僅靠角膜自身修復(fù)作用不能進(jìn)行角膜堿燒傷的完全修