姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體治療兔角膜堿燒傷的研究.pdf

1、目的：
　　制備姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體，檢測(cè)該藥在眼部應(yīng)用安全基礎(chǔ)上，建立兔角膜堿燒傷模型，評(píng)價(jià)該脂質(zhì)體對(duì)兔角膜堿燒傷的治療作用，并初步探討其作用機(jī)制，為姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體滴眼液的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　(1)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體的制備和評(píng)價(jià)。采用薄膜分散法制備姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體(curcumin-loaded chitosan liposomes，CCLP)，測(cè)定其粒徑和Zeta電位，離心法測(cè)定其包封率。<

2、br>　　(2)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體眼部應(yīng)用安全性評(píng)價(jià)。6只兔隨機(jī)分為姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體組和生理鹽水組，每組3只，右眼為實(shí)驗(yàn)眼。姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體組滴姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體滴眼液，生理鹽水組滴生理鹽水(0.9％Nacl)，4次/天，連續(xù)給藥14天，通過(guò)肉眼觀察兔子反應(yīng)、裂隙燈微觀觀察、采用Draize眼刺激性實(shí)驗(yàn)評(píng)分、病理切片，評(píng)價(jià)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體滴眼液對(duì)正常兔眼有無(wú)明顯毒性。
　　(3)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體治療兔角膜堿燒傷的研究。35

3、只新西蘭大白兔隨機(jī)分為：正常對(duì)照組3只、生理鹽水組8只、空白殼聚糖包衣脂質(zhì)體組8只、地塞米松組8只和姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體組8只，除正常對(duì)照組外，均選用右眼建立角膜堿燒傷模型，各組分別給予相應(yīng)藥物治療，4次/天，連續(xù)給藥14天。裂隙燈觀察角膜新生血管（corneal neovascularization, CNV）生長(zhǎng)情況及角上皮愈合情況，并用裂隙燈進(jìn)行眼前節(jié)照相；分析CNV的長(zhǎng)度及面積，角膜上皮愈合率。于堿燒傷后1、4、7、14天，取兔房

4、水檢測(cè)白介素-8（interleukin-8,IL-8）的含量。堿燒傷后7、14和28天隨機(jī)抽取各組兔取角膜，行病理切片觀察角膜形態(tài)；免疫組化法觀察血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　(1)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體的性質(zhì)。成功制備出姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體滴眼液，測(cè)得平均粒徑為96.6±14.7 nm，平均Zeta電位為58.8±2.3 mV，平

5、均包封率為51.41±1.05%，符合眼用制劑要求，可作為滴眼液用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
　　(2)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體安全性好。短期局部應(yīng)用姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體滴眼后兔子無(wú)明顯撓抓眼部情況；裂隙燈檢查，結(jié)膜、角膜透明，虹膜無(wú)滲出，晶體透明；兩組角膜、虹膜及結(jié)膜Draize評(píng)分比較無(wú)差異（p>0.05）；病理切片示角膜無(wú)炎性細(xì)胞。
　　(3)姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體、地塞米松（dexamethasone, DX）和生理鹽水組相比均能有效抑制 C

6、NV的生長(zhǎng)（p<0.05），空白殼聚糖包衣脂質(zhì)體組和生理鹽水組CNV面積和長(zhǎng)度沒(méi)有顯著差異（p>0.05）。與地塞米松組相比，在治療早期，姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體組的CNV長(zhǎng)度和面積大（p<0.05）；在治療后期，地塞米松組和姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體組的CNV長(zhǎng)度和面積無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）。姜黃素殼聚糖脂質(zhì)體組與生理鹽水組相比，能促進(jìn)角膜上皮恢復(fù)（p<0.05），減輕炎癥，有效降低角膜組織中 VEGF的表達(dá)（p<0.05），降低房水中IL-