鹽酸洛拉曲克長循環(huán)脂質體的制備及其抑瘤特性研究.pdf

1、鹽酸洛拉曲克(NLTX)為胸苷合成酶特異性抑制劑，為新合成的抗腫瘤藥物。鹽酸洛拉曲克存在半衰期較短，靶向性較差的缺點，限制了臨床應用。長循環(huán)脂質體作為一種新型劑型，具有靶向和緩釋的效果，正好彌補了鹽酸洛拉曲克缺點。本研究進行了鹽酸洛拉曲克長循環(huán)脂質體(LCL-NLTX)的初步研制，以期提高鹽酸洛拉曲克抗腫瘤活性。 為了提高脂質體的穩(wěn)定性，采用兩親性DSPE-PEG2000、飽和磷脂HSPC及膽固醇為膜材。為提高脂質體包封率，采用

2、薄膜擠壓法結合硫酸銨梯度法制備LCL-NLTX。為控制LCL-NLTX的質量，建立了測定脂質體中NLTX的透析法-紫外分光光度法，該方法能準確測定脂質體中NLTX的含量和脂質體的包封率。選定298nm為檢測波長，制定標準曲線C=31.629A-0.083(r=1.000P＜0.001)。用上述方法測得LCL-NLTX包封率為68.04％±1.11％。 脂質體的穩(wěn)定性研究包括采用激光粒度儀檢測LCL-NLTX的粒徑大小，用透射電鏡

3、觀察脂質體的形態(tài)，行體外釋藥試驗及考察脂質體經(jīng)濾過消毒后滲漏率。將脂質體于4、20、40℃條件下避光密閉放置1、15、30、60及90天，對其外觀、粒徑大小和包封率進行考察，評價脂質體制劑的穩(wěn)定性。結果顯示，脂質體粒徑平均值為109.3nm，分散度為0.14；透射電鏡圖片顯示脂質體外觀圓整，粒徑規(guī)一；除在4℃，粒徑、包封率無變化外，其他條件下隨著溫度升高及時間延長，LCL-NLTX的粒徑變大、包封率下降。故認為LCL-NLTX必須低溫儲

4、存。在PBS和人血漿兩種介質中行體外釋藥試驗，結果顯示LCL-NLTX無論在PBS和人血漿中均有較好的穩(wěn)定性。LCL-NLTX經(jīng)0.22μm濾膜濾過消毒后滲漏率基本控制在2％以內，基本能滿足實驗需要。 體外抑瘤試驗采用MTT法檢測CL-NLTX、LCL-NLTX對人肝癌細胞株HepG2的2h及48h生長抑制率，并推算各自IC50。結果顯示在2h三組均有非常顯著性差異，P＜0.001；在48h顯示F-NLTX與另兩組有顯著性差異，

5、P＜0.05。推測是由于脂質體尤其是長循環(huán)脂質體的緩釋性所致。 體內抑瘤試驗采用動物移植性腫瘤實驗法，用H22小鼠肝癌細胞接種于昆明小鼠后肢右腋皮下形成實體瘤，考察LCL-NLTX、CL-NLTX和F-NLTX給藥后對實體瘤的瘤重抑制率及腫瘤體積變化。結果顯示CL-NLTX、LCL-NLTX均具有抗腫瘤效應；LCL-NLTX較F-NLTX及CL-NLTX短時間內抑瘤性較差，而長時間則顯較強的抑瘤性，其瘤重抑制率為41.86％，顯