紫杉醇棕櫚酸酯長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的研究.pdf

1、紫杉醇(PTX)系一種從短葉紅豆杉樹皮中分離出來(lái)的具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的二萜類化合物，該化合物有著良好的抗腫瘤活性，多年來(lái)成為臨床廣泛使用的抗腫瘤藥物，主要應(yīng)用于卵巢癌、肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、淋巴瘤，并且具有很好的療效。市售紫杉醇注射液因加入了聚氧乙烯蓖麻油易引起過敏反應(yīng)及不同程度的毒性反應(yīng)，存在著嚴(yán)重的安全性問題。而脂質(zhì)體作為一種靶向制劑是紫杉醇一個(gè)理想的給藥載體，但是由于紫杉醇親脂性較低，紫杉醇無(wú)法較好地包封入脂質(zhì)體中，導(dǎo)致其脂質(zhì)體制劑載藥

2、量低、穩(wěn)定性差。所以本課題擬從紫杉醇化學(xué)修飾和制劑兩個(gè)方面入手，制備出載藥量高、穩(wěn)定性好的紫杉醇前藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。
　　本研究通過棕櫚酸與紫杉醇C2'羥基發(fā)生酯化得到紫杉醇棕櫚酸酯(PTX-PA)，經(jīng)核磁共振氫譜鑒定，表明合成產(chǎn)物為目標(biāo)化合物，產(chǎn)物最終合成產(chǎn)率約為70％。對(duì)該化合物在200-400nm波長(zhǎng)范圍進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果表明其最大吸收波長(zhǎng)為227nm。采用互為飽和的正辛醇及水測(cè)定了紫杉醇棕櫚酸酯的油水分配系數(shù)為8.65，遠(yuǎn)高

3、于紫杉醇的油水分配系數(shù)2.74，親脂性得到極大的提高，該性質(zhì)能很好的滿足長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的制備。
　　考察了采用薄膜分散法及乙醇注入法制備紫杉醇棕櫚酸酯長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體(PPSL)，同時(shí)對(duì)制備脂質(zhì)體的磷脂種類、磷脂與膽固醇的質(zhì)量比、藥脂比、DSPE-PEG2000含量等單因素對(duì)制備脂質(zhì)體的粒徑、外觀、過膜性能的影響進(jìn)行了考察，最終確定采用薄膜分散法:磷脂為PC98-T，藥脂比為1∶20，DSPE-PEG2000含量為0.3％。優(yōu)化后脂質(zhì)體

4、的平均粒徑為78.2nm，包封率為98.28％。
　　建立了HPLC方法測(cè)定大鼠血漿中PTX-PA及其活性代謝產(chǎn)物紫杉醇(PTX)的含量，比較了PPSL與紫杉醇注射液在藥代動(dòng)力學(xué)的不同。結(jié)果表明，PPSL在大鼠體內(nèi)緩慢代謝出母藥紫杉醇，母藥紫杉醇的半衰期為33h，遠(yuǎn)大于紫杉醇注射液半衰期1.43h，并且其AUC是紫杉醇注射液的4.5倍左右，從而延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間。
　　建立了HPLC方法測(cè)定小鼠心、肝、脾、肺、腎及腫瘤

5、組織中PTX-PA及其活性代謝產(chǎn)物PTX的含量，對(duì)比了PPSL與紫杉醇注射液在各組織分布的差異。組織分布結(jié)果表明，PPSL組腫瘤組織中的PTX-PA在12小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間增加，其他大部分組織中PTX-PA濃度隨時(shí)間降低，其中腎與脾含量極低;同時(shí)PPSL組腫瘤組織中PTX濃度大于紫杉醇注射液組，并且維持較高濃度，更進(jìn)一步說明PPSL具有較好的腫瘤靶向性，并能在腫瘤組織中代謝出PTX發(fā)揮藥效。
　　通過選取S180荷瘤小鼠為模型，考察了同

6、等劑量（摩爾量相同）PPSL與紫杉醇注射液的抗腫瘤效果，結(jié)果表明，紫杉醇注射液組抑瘤率僅為41.57％，而PPSL組抑瘤率63.48％。同時(shí)對(duì)PPSL安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，主要包括刺激性、溶血性和急性毒性。用家兔進(jìn)行血管刺激性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，PPSL對(duì)血管及周圍組織沒有刺激性;體外溶血性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，PPSL不引起溶血或凝聚反應(yīng);采用ICR小鼠進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，最高給藥劑量500mg/kg下14天內(nèi)未有小鼠死亡，說明PPSL毒性極