依托泊苷靜脈注射亞微乳劑的研究.pdf

1、靜脈注射亞微乳劑以其安全低毒、生物相容性好的特點(diǎn)可以作為親脂性抗癌藥物的優(yōu)良載體。本研究的目的是運(yùn)用高壓均質(zhì)技術(shù)和膜載藥原理，制備一種高效、穩(wěn)定的依托泊苷靜脈注射亞微乳劑(ESE)，對(duì)其制備處方工藝和理化性質(zhì)進(jìn)行研究，探討藥物在亞微乳劑中的分布情況，并比較依托泊苷溶液劑和乳劑引起的刺激性和大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)行為。
　　 確立了依托泊苷的體外分析方法。采用HPLC法測(cè)定ESE含量及降解產(chǎn)物，預(yù)測(cè)了可能的降解產(chǎn)物和途徑，分析方法可行

2、，重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度高。依托泊苷在不同介質(zhì)中的溶解度結(jié)果表明其屬于油水均難溶藥物，且未見(jiàn)pH依賴性；通過(guò)計(jì)算得到依托泊苷的油相/水相分配系數(shù)為1.2。測(cè)得依托泊苷的油水分配系數(shù)約為9.78，屬于親脂性藥物。
　　 依托泊苷在緩沖鹽中的水解動(dòng)力學(xué)研究表明，80℃下藥物在pH<2和pH>8的水溶液中迅速降解，在pH3.5～5.3范圍最穩(wěn)定；依托泊苷的降解符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，且隨著緩沖鹽濃度的增加而加速，通過(guò)外推計(jì)算得到依托泊苷在不含緩

3、沖鹽水溶液中各pH值的logk2.5、logk3.5、logk4.5、logk5.3、logk6.5和logk7.5分別為-2.15、-3.14、-3.59、-3.39、-2.45和-1.53。
　　 確定了ESE的最終處方及制備工藝為：按質(zhì)量百分比，油相組成為依托泊苷0.1％、LCT和MCT各10％、豆磷脂1.8％、油酸0.05％，水相組成為甘油2.5％、Tween800.1％、F680.2％、加注射用水至全量；制備初乳的油相

4、和水相溫度分別為80℃和70℃，均質(zhì)前調(diào)節(jié)初乳pH值至5.5，高壓均質(zhì)參數(shù)為800 bar壓力循環(huán)6次，滅菌條件為100℃水浴旋轉(zhuǎn)滅菌30 min。分別采用激光散射法和超濾離心法測(cè)定其粒徑、zeta-電位和包封率，測(cè)得三批ESE平均粒徑180.1±52.2 nm，zeta-電位-24.8 mV，包封率91.0％。
　　 低溫長(zhǎng)期留樣和加速試驗(yàn)考察ESE物理化學(xué)穩(wěn)定性，采用恒溫加速試驗(yàn)考察溫度、pH值和藥物濃度對(duì)ESE化學(xué)穩(wěn)定性的

5、影響。依托泊苷在ESE中的降解符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。4℃長(zhǎng)期留樣9個(gè)月物理穩(wěn)定性無(wú)顯著變化。加速試驗(yàn)預(yù)測(cè)4℃有效期(T0.9)約為427天；在80℃下，ESE在pH>8時(shí)降解迅速，降解半衰期(t1/2)約為1.61 h，而在pH3.85～6.15范圍內(nèi)具有最大化學(xué)穩(wěn)定性，降解半衰期(t1/2)分別為42.99和32.71天，與水溶液相比，在各pH值條件下ESE化學(xué)穩(wěn)定性較藥物水溶液顯著提高，采用數(shù)學(xué)模型推測(cè)其原因主要為絕大部分藥物主要分布

6、于亞微乳劑的界面膜上，減少了與水溶液的直接接觸；依托泊苷在ESE中的降解具有濃度依賴性，logk0.02、logk0.1、logk0.5和logk1分別為-7.19、-6.29、-5.74和-5.45。采用超濾離心法進(jìn)行體外釋放研究，結(jié)果顯示由于無(wú)限稀釋效應(yīng)ESE在pH7.4的PBS中，1h內(nèi)基本釋放(>90％)。
　　 以依托泊苷溶液劑為參比制劑，測(cè)定ESE大鼠體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)特征，結(jié)果表明，ESE和溶液劑在大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)

7、曲線均符合雙隔室模型，AUC0-t分別為(18.30±8.74)和(19.32±6.45)μg·h·mL-1，MRT分別為(1.46±0.32)和(1.71±0.52)h；依托泊苷在大鼠組織中的分布濃度由大到小的順序依次是：肝、心臟、肺、腎、脾，腦組織中未檢測(cè)出藥物存在。二者RES uptake無(wú)顯著差異，說(shuō)明ESE無(wú)肝脾靶向性，結(jié)果ESE除了在心臟中的分布略有增高外，未改變藥物在大鼠血漿中的藥動(dòng)學(xué)行為和組織中的分布。安全性試驗(yàn)表明，E