大蒜素靜脈注射納米乳研究.pdf

1、納米乳用于靜脈給藥系統(tǒng)時(shí)，具有載藥量大、可降低藥物刺激性等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于具有靜脈注射血管刺激性強(qiáng)藥物的載體，但是納米乳降低藥物靜脈注射時(shí)刺激性的機(jī)理尚待進(jìn)一步揭示，納米乳制備方法和釋藥行為等與之密切相關(guān)，本文以具有明顯靜脈刺激性的脂溶性藥物大蒜素為主藥，制備大蒜素靜脈注射納米乳，對(duì)其穩(wěn)定性、血管刺激性、體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為等方面進(jìn)行了研究，主要研究工作如下：
　　 （1）大蒜素靜脈注射納米乳的制備與穩(wěn)定性研究。首先進(jìn)行處方前研究，

2、考察了各種外界因素對(duì)主藥大蒜素穩(wěn)定性的影響，結(jié)果表明，堿性環(huán)境對(duì)大蒜素影響最大，高溫、氧化、光照條件次之，而酸性環(huán)境對(duì)藥物的影響相對(duì)較小。其次進(jìn)行大蒜素納米乳處方設(shè)計(jì)及制備工藝研究，選取油酸、抗氧化劑VE的比例進(jìn)行處方的單因素考察，優(yōu)選最佳處方；并考察了初乳制備條件、勻質(zhì)條件、制備溫度、pH值、滅菌條件對(duì)納米乳質(zhì)量的影響，篩選出最優(yōu)的工藝條件。然后進(jìn)行大蒜素納米乳的穩(wěn)定性研究，考察了大蒜素納米乳在高溫、冷凍、光照、低溫條件下的穩(wěn)定性以及

3、溶液稀釋穩(wěn)定性，研究結(jié)果表明：高溫、光照條件會(huì)使藥物含量減小，有關(guān)物質(zhì)含量增加，pH值降低，冷凍條件下納米乳發(fā)生分層現(xiàn)象；而在低溫條件下各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著改變；大蒜素納米乳采用0.9％氯化鈉溶液和5％葡萄糖溶液稀釋14倍后，在48 h內(nèi)未出現(xiàn)粒徑顯著增大情況，說(shuō)明該制劑經(jīng)稀釋后穩(wěn)定性好。
　　 （2）大蒜素靜脈注射納米乳降低血管刺激性研究。首先，以?xún)?yōu)化的大蒜素納米乳處方為基礎(chǔ)，添加助乳化劑，或改變油相，制備并表征了不同乳化劑組成或

4、不同油相的大蒜素納米乳。添加助乳化劑poloxamer188和soluto HS15后，大蒜素納米乳粒徑均顯著減小，zeta電位無(wú)顯著變化。但是隨著添加量增大，粒徑有增大的趨勢(shì)，zeta電位有減小的趨勢(shì)。三種油相及其混合物制備的大蒜素納米乳粒徑按照中鏈甘油三酯（MCT）、大豆油和橄欖油的順序依次減小，zeta電位無(wú)顯著性差異。然后采用體外血管內(nèi)皮細(xì)胞耐受性試驗(yàn)和體內(nèi)兔耳血管刺激性試驗(yàn)考察了不同乳化劑組成和不同油相的大蒜素納米乳的刺激性，

5、體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)反映了相同的刺激性變化規(guī)律，與未添加助乳化劑的大蒜素納米乳相比，poloxamer188添加量為0.2％和0.4％時(shí)，大蒜素納米乳的刺激性顯著下降（p＜0.05），但是poloxamer188添加量為0.6％以及solutol HS15添加量為0.2％、0.4％和0.6％時(shí)，大蒜素納米乳的刺激性均顯著增強(qiáng)（p＜0.05）；與大豆油為油相的大蒜素納米乳相比，MCT為油相的大蒜素納米乳刺激性顯著降低（p＜0.05），而橄欖

6、油為油相的大蒜素納米乳刺激性顯著增強(qiáng)（p＜0.05）。推測(cè)載藥納米乳水相藥物是導(dǎo)致其刺激性的主要原因，采用大體積平衡反相透析法測(cè)得的大蒜素納米乳水相藥物濃度分布規(guī)律與體內(nèi)外刺激性試驗(yàn)結(jié)果均存在顯著正相關(guān)（p＜0.01），驗(yàn)證了推測(cè)的合理性。大蒜素納米乳水相藥物濃度符合Fick第一擴(kuò)散定律，大蒜素在分散相和連續(xù)相間的分配系數(shù)（Kds）是決定添加助乳化劑的大蒜素納米乳水相中藥物濃度的主要因素，而油相調(diào)控大蒜素納米乳水相藥物濃度的方式是形成不

7、同粒徑的納米乳。
　　 （3）大蒜素靜脈注射納米乳在家兔體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)及在小鼠體內(nèi)的組織分布行為研究。建立以溴苯為內(nèi)標(biāo)，測(cè)定血液和組織樣品大蒜素濃度的GC-ECD法。藥動(dòng)學(xué)結(jié)果表明，大蒜素Tween80水溶液（DS）、大蒜素納米乳（DNE）和添加0.2％ poloxamer188的大蒜素納米乳（P-DNE）靜脈注射后，在家兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為均符合三室模型，DNE與DS具有相似的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為，與DNE和DS相比，P-DNE的AUC顯

8、著增加（p＜0.05)，清除率CL顯著減?。╬＜0.05)。組織分布研究表明，在肝、脾、腎、心和腦組織，DS組與DNE組的AUC差異不顯著（p＞0.05），而在肺臟，DS的AUC值顯著低于DNE（p＜0.05）。P-DNE的肝臟和脾臟AUC顯著低于DS和DNE（p＜0.05），腦組織AUC顯著高于DS和DNE（p＜0.05）。這表明助乳化劑poloxamer188的加入使得DNE的RES攝取率顯著降低，并使大蒜素的腦分布顯著增加。

9、>　　 （4）藥動(dòng)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)大蒜素半衰期極短，消除速率較高，為了揭示大蒜素的體內(nèi)代謝過(guò)程，進(jìn)行了大蒜素肝微粒體代謝初步研究。采用大鼠肝微粒體體外孵育法研究了大蒜素肝微粒體酶動(dòng)力學(xué)行為，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大蒜素的肝微粒體代謝符合米氏動(dòng)力學(xué)模型，米氏參數(shù)（Km）為0.60mmol/L，表觀最大反應(yīng)速率（Vmax）為19.91nmol/min/mg protein，大蒜素的清除率（Clint）為0.033 mL/min/mg protein。GC/M