約氏瘧原蟲感染小鼠巨噬細胞活化和效應特點的研究.pdf

1、瘧疾是全球關注、高發(fā)的感染性疾病。Nature最新報道顯示，截止2002年，世界感染瘧疾的患者人數(shù)達5.15億，全球受威脅人口達22億。為此，WHO將艾滋病、結核和瘧疾列為三類優(yōu)先重點防治的感染性疾病。目前，瘧疾疫苗和抗瘧新藥的研制與開發(fā)是有效控制瘧疾發(fā)生和發(fā)展的重要戰(zhàn)略，其必需的前提基礎有賴于對宿主保護性免疫應答機制的進一步闡明。 單核-巨噬細胞在不同方面明顯影響著瘧原蟲的感染過程，它既可作為非特異免疫系統(tǒng)細胞發(fā)揮非特異性吞噬

2、、殺傷作用，也可參與介導特異性免疫應答，發(fā)揮抗原提呈和免疫調節(jié)的重要作用。大量研究表明，紅內期保護性免疫應答的鮮明特點是Th1和Th2型免疫應答的有序活化，由CD<,4><'+>Th細胞和抗體共同參與。感染急性期以IFN-γ為主導的Th1型炎癥性細胞因子活化巨噬細胞等免疫效應細胞，遏制瘧原蟲在紅內期的爆發(fā)性增殖，有效控制原蟲血癥的迅速上升；隨后應答向Th2型過渡，最終以抗體介導的免疫效應徹底清除瘧原蟲。前期研究已證實，活化的單核.巨噬細

3、胞在約氏瘧原蟲感染早期可能是遏制蟲體血癥水平的關鍵因素之一。因此，有必要對巨噬細胞在整個感染過程中的活化規(guī)律和效應特點進行更深一步探討和闡明。 本研究選用P.y 17XL抵抗型DBA/2小鼠為研究對象，首次全程動態(tài)觀察巨噬細胞表面膜分子、效應分子NO含量及其吞噬功能的變化，以期進一步闡明在瘧疾感染中巨噬細胞的活化規(guī)律和效應特點，旨在為有效瘧疾疫苗和抗瘧新藥的研制、開發(fā)提供新的理論和實驗依據(jù)。 實驗材料與方法: 本

4、研究選用P.y 17XL抵抗型DBA/2小鼠為研究對象。Giemsa薄血膜染色，光學顯微鏡計數(shù)紅細胞感染率；流式細胞技術動態(tài)檢測DBA/2小鼠在P.y 17XL感染過程中，脾巨噬細胞數(shù)量，表面膜分子CD36、CD64和MHC Ⅱ的表達水平；通過Griess反應，測定脾巨噬細胞分泌NO<,2><'->的含量；顯微鏡檢巨噬細胞的吞噬功能。數(shù)據(jù)以均值±標準差(x±s)表示，數(shù)據(jù)經t檢驗，P<0.05為差異顯著。 結論: 在致死

5、型約氏瘧原蟲感染過程中，巨噬細胞無論在天然免疫和獲得性免疫中均發(fā)揮重要的作用。 1.DBA/2小鼠脾巨噬細胞的數(shù)量呈現(xiàn)逐步升高的動態(tài)變化趨勢； 2．通過MHC Ⅱ類分子表達，提示巨噬細胞在IFN-γ刺激作用下發(fā)生了有效活化； 3．巨噬細胞表達的清道夫受體CD36在感染早期顯著增加，介導非調理性吞噬殺傷作用； 4．作為巨噬細胞表達的FcγRI(CD64)在感染后期的顯著增加，可能參與抗體介導的調理性吞噬殺傷