骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4對(duì)大鼠肝源性肝干細(xì)胞增殖與分化的影響.pdf

1、目的:探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4對(duì)大鼠原位肝干細(xì)胞,即肝卵圓細(xì)胞HOC的增殖及分化的影響。
　　 方法:采用重組因子BMP4及重組腺病毒BMP4作用于大鼠HOC,以BMP-4拮抗劑重組因子Noggin及重組腺病毒BMP4-shRNA阻斷:BMP-4的作用以便實(shí)驗(yàn)對(duì)照,另外還設(shè)有空腺病毒組及未處理組作為試驗(yàn)對(duì)照。在實(shí)驗(yàn)不同時(shí)間點(diǎn),通過(guò)四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)BMP-4對(duì)HOC增殖的影響,透射電鏡下觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)特征,RT

2、-PCR檢測(cè)各試驗(yàn)組中不同HOC可能分化后細(xì)胞表型特異性分子標(biāo)志物的mRNA表達(dá)情況,以過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)(PAS)檢測(cè)細(xì)胞的糖原的合成與儲(chǔ)積情況,并通過(guò)吲哚氰綠(ICG)攝取排泌試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的代謝功能。
　　 結(jié)果:細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示,在不同作用時(shí)間點(diǎn),BMP-4干預(yù)組的細(xì)胞吸光值均高于抑制劑處理組和空白對(duì)照組。透射電鏡下可觀察到BMP-4干預(yù)后的HOC具有分化良好的上皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)特征。RT-PCR顯示BMP-4誘導(dǎo)HOC分化后