大黃對(duì)大鼠肝再生中肝卵圓細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型上腹腔注射大黃原液的方法，觀察大黃原液對(duì)大鼠肝卵原細(xì)胞增殖的影響。
　　方法：選擇SPF級(jí)Wistar大鼠80只，雄性，體重為200g±30g，隨機(jī)分為4組：正常組20只、假手術(shù)組20只、模型組20只、大黃組20只。正常組大鼠不作任何處理而直接觀察；假手術(shù)組大鼠剖開(kāi)腹腔后立即縫上予繼續(xù)觀察；模型組大鼠按15 mg/(kg2d)劑量灌喂2-乙酰氨基芴，連續(xù)4 d，第5天不灌喂，行2/3肝切除，

2、術(shù)后次日按15 mg/(kg2d)劑量繼續(xù)灌喂5d；大黃組大鼠按模型組建模，并在每次2-乙酰氨基芴灌喂前1h分別予以大黃原液1ml/100g/d腹腔內(nèi)注射，持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。造模成功后分別在（4 h，4 d，8 d，12 d，16 d）5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，各組隨機(jī)抽取4只大鼠，經(jīng)1％戊巴比妥鈉麻醉，腹主動(dòng)脈采血做 ALT、AST、TBiL、PT等相關(guān)血清生化指標(biāo)檢測(cè)。采血完畢，剖取肝臟三角葉，PBS洗凈肝組織，濾紙吸干，稱重，分別予10%甲醛液固

3、定及液氮保存，待標(biāo)本采集完畢，采用免疫組織化學(xué)法和細(xì)胞形態(tài)學(xué)方法計(jì)數(shù) OV-6染色陽(yáng)性的HOC。
　　結(jié)果：（1）血清ALT、AST、TBiL定量測(cè)定結(jié)果：正常組與假手術(shù)組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均未發(fā)現(xiàn)ALT、AST、TBiL的異常；模型組及大黃組ALT、AST出現(xiàn)異常（升高），并且在術(shù)后4h到達(dá)峰值，隨后逐漸下降，大黃組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；模型組與正常組及假手術(shù)組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）

4、。模型組及大黃組 TBiL的峰值出現(xiàn)在術(shù)后4d，模型組與正常組及假手術(shù)組比較差異顯著（P<0.01）；大黃組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（2） PT測(cè)定結(jié)果：正常組與假手術(shù)組在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均未發(fā)現(xiàn) PT的異常，模型組及大黃組 PT值延長(zhǎng)，峰值出現(xiàn)在術(shù)后第4d，隨后逐漸趨于正常。模型組與正常組和假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；大黃組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（3）肝重指數(shù)（HMI）：

5、各組大鼠肝重指數(shù)在4h時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異，而正常組與假手術(shù)組肝重指數(shù)在4d、8d、12d、16d四個(gè)時(shí)間點(diǎn)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），模型組和大黃組在8d、12d、16d四個(gè)時(shí)間點(diǎn)的肝重指數(shù)均較正常組和假手術(shù)組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），大黃組與模型組肝重指數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。（4）肝臟增殖指數(shù)（PI）：模型組與大黃組肝臟 DNA增殖峰值出現(xiàn)在術(shù)后8d，隨后逐漸下降，與正常組和假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義（P<0.05），大黃組與模型組肝臟增值指數(shù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（5）肝組織PCNA：模型組及大黃組PCNA高峰出現(xiàn)在術(shù)后4d，隨后逐漸下降，模型組和大黃組與假手術(shù)組和正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在成模后4d、8d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)模型組 PCNA水平高于大黃組（P<0.05）。（6）HOC增值情況：正常組、假手術(shù)組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)所見(jiàn)肝小葉、肝竇結(jié)構(gòu)清晰，無(wú)增生反應(yīng)。模型組和大黃組肝索結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞壞死，匯

7、管區(qū)伴有增生反應(yīng)。與模型組比較大黃組肝組織破壞輕，恢復(fù)快，增生反應(yīng)輕；模型組4d匯管區(qū)有明顯HOC增殖反應(yīng),8dHOC增殖達(dá)峰值；大黃組各時(shí)間點(diǎn) HOC增殖指數(shù)低于模型組(P<0.05),并在12d時(shí)間點(diǎn)HOC增殖達(dá)峰值。
　　結(jié)論：1.利用2-乙酰氨基茐+2/3肝切除術(shù)模型可以獲得穩(wěn)定的大鼠肝卵圓細(xì)胞；2.大黃原液可以有效降低大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型中升高的膽紅素及轉(zhuǎn)氨酶，并有助于改善凝血功能；3.大黃原液可調(diào)節(jié)HOC的增殖過(guò)程，