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文檔簡(jiǎn)介
1、目的：觀察經(jīng)典Wnt/β-catenin以及骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）信號(hào)通路對(duì)大鼠骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖以及向成骨方向分化的影響。
方法：應(yīng)用密度梯度離心聯(lián)合貼壁篩選法分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并分成四組：對(duì)照組，Wnt組，BMP組，Wnt3a和BMP-2聯(lián)合組，在不同時(shí)間點(diǎn)用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8（CCK-8）法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，堿性磷酸酶（ALP）活性定量測(cè)定、Von Kossa染色觀察細(xì)胞向成骨分化情況和基質(zhì)礦化程
2、度。反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）檢測(cè)成骨特異性標(biāo)志物表達(dá)。
結(jié)果：培養(yǎng)第7d，CKK-8測(cè)吸光度值聯(lián)合組為0.845，Wnt組為0.738，明顯高于對(duì)照組0.409（P<0.05）。培養(yǎng)第6d和第12d，ALP活性吸光度值聯(lián)合組為63.8和144.3，BMP-2組為40.8和104.1，均明顯高于對(duì)照組7.3和18.9（P<0.05）。培養(yǎng)14d后，聯(lián)合組骨鈣素mRNA表達(dá)量高于對(duì)照組，而Runx2及Osterix
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