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文檔簡介
1、目的:
建立血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞肥大模型,并觀察各組心肌細(xì)胞泛素化蛋白水平的變化。
方法:
血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞肥大模型建立:H9c2心肌細(xì)胞在含10%FBS的高糖DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)48 h,消化傳代后,分別以3個(gè)AngⅡ濃度組(10-8、10-7、10-6mol/L)分別處理不同時(shí)間(0、6、12、24、48、72h),另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照組;BCA法測量其總蛋白含量;并測量相同面積
2、下心肌細(xì)胞數(shù),計(jì)算心肌細(xì)胞相對(duì)表面積。
觀察泛素化結(jié)蛋白水平的變化。常規(guī)傳代培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞,分別以4個(gè)AngⅡ濃度組(0、10-8、10-7、10-6mol/L)分別處理不同時(shí)間(0、6、12、24、48、72h),Western blot法及免疫組織化學(xué)法檢測泛素化結(jié)蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果用x±S.E.M表示,用SPSS14.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,兩組數(shù)據(jù)比較統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用兩個(gè)獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)。
結(jié)
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