Van der Woude綜合征致病基因與表型及IRF6 G820A多態(tài)與非綜合征性唇腭裂相關(guān)性的研究.pdf

1、Van der WOEade綜合征(Van der Woude syndrome，VWS，OMIM 119300)是最常見的唇腭裂綜合征，VWS具有獨(dú)特的臨床表型和遺傳學(xué)特點(diǎn)，是最“簡(jiǎn)單”的一種唇腭裂綜合征。VWS被認(rèn)為是在600多種綜合征性唇腭裂中突破非綜合征性唇腭裂易感基因遺傳研究障礙的最好模型。2002年Kondo采用雙生子法證實(shí)lq32-1q4l的干擾素調(diào)節(jié)因子6(interferonregtJlatory factor 6，I

2、RF 6)基因突變可致VWS的發(fā)生。隨后的10篇文章，共有23個(gè)家系的報(bào)道；這些研究的樣本量都較小，使研究者未能進(jìn)一步對(duì)致病基因IRF6的突變的情況、VWS的表型及二者的關(guān)系進(jìn)行研究。 在IRF6基因確定為VWS的致病基因后，IRE基因的SNP研究越來越多。用于研究與非綜合癥性唇腭裂的SNPs 30余種，其中研究最多的是G820A多態(tài)。這一多態(tài)發(fā)生在IRF6 SMIR域的一個(gè)高度保守殘基上，274位頡氨酸變?yōu)楫惲涟彼幔谖词芾廴?/p>

3、群中較常見，是一個(gè)很有研究價(jià)值的唇腭裂候選修飾基因。已有的4篇研究報(bào)道多為歐洲人群，但是，在歐洲人群中，等位基因G的頻率為97％，使用此多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行相關(guān)分析，其效力有所折扣。而在亞洲人群中，等位基因A的頻率達(dá)30-40％左右，在中國人群中研究此多態(tài)與非綜合征性唇腭裂易感性的關(guān)系，其結(jié)果令人信服。目前對(duì)中國人群中還未見有對(duì)VWS致病基因與表型的研究，對(duì)中國人群非綜合征性唇腭裂與IRF6 G820A多態(tài)的關(guān)系還不清晰。 基于以上研究

4、現(xiàn)狀，本文旨在收集Van der woude綜合征家系及非綜合征性唇腭裂患者，對(duì)VWS致病基因：RF6的突變的情況、VWS的表型及二者的關(guān)系進(jìn)行研究，以建立中國人VWSIRF6基因突變圖譜，以便對(duì)IRF6基因突變攜帶者行產(chǎn)前診斷與治療。了解IEF6G820A多態(tài)在中國人群中與非綜合征性唇腭裂易感性的關(guān)系，了解非綜合征性唇腭裂易感性的易感因素，以對(duì)有唇腭裂病人的家庭提供有效遺傳咨詢。 1以華西口腔醫(yī)院頜面外科病房和南陽市口腔

5、醫(yī)院臨床收集的Vander WotJde綜合征家系患者為研究對(duì)象，收集了14個(gè)較完整的家系資料，采集了外周靜脈血，提取了基因組DNA。采用直接測(cè)序法對(duì)候選基因．[YF6外顯子及部分內(nèi)含子序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測(cè)序進(jìn)行突變分析，發(fā)現(xiàn)所有的患者都有基因突變，共有13種，其中10個(gè)為國際上尚未報(bào)道的新突變：CC5.6GT，T342A，566delA，C748T，T981A，C989A，C1209G，T1214C和1316delT。另3種突變?yōu)镃

6、1234T、C226T和C352T，與Kondo等的報(bào)道相同；其中C1234T突變?cè)趦蓚€(gè)家系出現(xiàn)。14個(gè)家系37個(gè)病人總的臨床表型與國外患者有所不同；同一個(gè)家庭的突變相同，但是表型有不同，這些表明有某種特定修飾基因控制VWS表型。 2對(duì)缺牙家系VWS9成員進(jìn)行表型分析，發(fā)現(xiàn)這個(gè)家系有不同于其它家系的表型——先天性少數(shù)牙缺失，并對(duì)此家系行先天少數(shù)缺牙致病基因MSX1序列分析了解VWS患者缺牙原因。在VWS9家系患者I:1和II"1

7、的MSX1第二外顯子出現(xiàn)雙峰，文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)為多態(tài)，其他正常成員未見此多態(tài)。兩個(gè)患者M(jìn)SXl基因中的多態(tài)，可能與患者的表型相關(guān)。而患者II:1有IRF6基因突變，其缺牙較多可能是IRF6基因突變和MSX1多態(tài)共同協(xié)同作用引起的。 3以華西口腔醫(yī)院頜面外科病房臨床收集的非綜合征性唇腭裂者為研究對(duì)象，收集了完整的臨床資料，采集了外周靜脈血，提取了基因組DNA。采用聚合酶鏈反應(yīng)一限制性酶切多態(tài)性的方法了解患者IRF6 基因G820A多態(tài)

8、三種基因型和兩種等位基因的分布，并以正常人群的分布作對(duì)照進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。在IRF6 G820A多態(tài)與非綜合征性唇腭裂易感性相關(guān)關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn)：在腭裂患者中等位基因A的頻率較對(duì)照組高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，等位基因A是腭裂的易感基因；基因型GG相對(duì)其他兩種基因型的OR值為0.25(95％可信區(qū)間，-0.06l-0.51)，等位基因G是腭裂的保護(hù)因素。而在唇裂組及總唇腭裂組未發(fā)現(xiàn)此多態(tài)分布的差異。 綜上所述，本研究結(jié)果擴(kuò)大了VWS