MTHFR基因C677T和A1298C多態(tài)與非綜合征性唇腭裂關系的研究.pdf

1、目的:探討代謝葉酸的亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR)基因C677T和A1298C位點單核苷酸多態(tài)(singlenucleotidepolymorphism，SNP)與非綜合征性唇腭裂(nonsyndromiccleftlipwithorwithoutcleftpalate，NSCL/P)發(fā)生的關系。 方法:提取76個患兒及父母和60個正常兒童外周血DNA，應

2、用聚合酶鏈式反應(polymerasechainreaction，PCR)分別擴增亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C片段，2％瓊脂糖凝膠電泳，EB染色檢測PCR擴增結果。用HinfⅠ、MboⅡ限制性內切酶酶切方法(restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP)分別酶切消化亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C片段，分別采用15％和20％非變性聚丙

3、烯酰氨凝膠(交聯(lián)度49∶1)電泳，常規(guī)硝酸銀染色，檢測亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C片段長度多態(tài)性，分析記錄基因型，用病例對照方法進行統(tǒng)計分析。 結果:對于MTHFR基因C677T，75個NSCL/P核心家庭中有48個雜合子父母，對其進行以父母為對照的病例對照研究，計算傳遞失衡指數(shù)(transmitteddisequillibriumtest，TDT)，x2=0.02，P＞0.05；76例NSCL

4、/P患兒和60例正常兒童基因型及等位基因頻數(shù)病例對照研究，x2＜9.91，P＜0.05；NSCL/P患兒不同類型與正常兒童的基因型和等位基因頻數(shù)相比較，結果單純性唇裂與對照組比較(x2=8.39，P＜0.05)和單側唇裂伴腭裂與對照組比較(x2=5.23，P＜0.05)差異有顯著性；有家族史與無家族史患兒基因型和等位基因頻數(shù)的比較，結果χ3=0.003，P＞0.05，差異無顯著性。而MTHFR基因A1298C，75個NSCL/P核心家庭

5、中有27個雜合子父母，對其進行以父母為對照的病例對照研究，計算TDT，x2=4.00，P＜0.05；76例NSCL/P患兒和60例正常兒童基因型及等位基因頻數(shù)病例對照研究，x2=4.42，P＜0.05。NSCL/P患兒不同類型與正常兒童的基因型和等位基因頻數(shù)相比較，結果單側唇裂伴腭裂與對照組比較(x2=4.38，P＜0.05)差異有顯著性；有家族史與無家族史患兒基因型和等位基因頻數(shù)的比較，結果x2=2.68，P＞0.05，差異無顯著性。