MTHFR基因C677T多態(tài)性與大腸癌中P-gp表達(dá)的相關(guān)性.pdf

1、目的:
　　 大腸癌是我國常見的消化道惡性腫瘤,其發(fā)病率逐年上升,且發(fā)病年齡有年輕化趨勢。當(dāng)今,手術(shù)和化療仍然是治療大腸癌的主要手段；而對于失去手術(shù)機(jī)會的晚期大腸癌患者來說,化療可能是唯一手段。但是臨床治療效果仍不十分滿意,給患者帶來了巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和痛苦；近年來研究證實(shí):多藥耐藥基因(MDR-1)表達(dá)產(chǎn)物P-糖蛋白(P-gp)是造成大腸癌化療失敗和早期復(fù)發(fā)的主要因?yàn)?是形成化療耐藥性的物質(zhì)基礎(chǔ)；因此研究大腸癌組織中P-gp的表達(dá)

2、與其臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系有十分重要的臨床意義。另外,目前報(bào)道了幾種亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因的單核苷酸多態(tài)性(SNP),其中一種SNP存在于密碼子677C→T,與大腸癌關(guān)系密切。我們試圖通過研究確定亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T多態(tài)性與該患者大腸癌組織中多藥耐藥基因(MDR-1)產(chǎn)物P—gp表達(dá)之間的關(guān)系,闡明MTHFR基因C677T多態(tài)性與大腸癌化療敏感性最關(guān)鍵的因素P-gp之間的關(guān)系,從而為臨床找到

3、能早期預(yù)測大腸癌化療療效的指標(biāo)提供可能,以便為患者提供更合理的化療方案。
　　 方法:
　　 用免疫組織化學(xué)方法(S-P)檢測68例患者大腸癌組織中P-gp的表達(dá)情況,并分析其與大腸癌各臨床病理學(xué)特征(包括大腸癌的分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,Duke's分期)的關(guān)系,探討P-gp在大腸癌發(fā)展中作用。同時(shí)我們抽取所有68例大腸癌患者術(shù)后、化療前外周靜脈抗凝血2ml,-80℃保存,用血液基因組DNA提取試劑盒提取外周靜脈血白細(xì)

4、胞DNA,然后用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析技術(shù)檢測68例患者M(jìn)THFR基因C677T基因型。并分析MTHFR基因C677T基因型與P-gp表達(dá)之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 PCR-RFLP分析技術(shù)結(jié)果顯示:68例大腸癌患者中,29例(42.6％)為MTHFR C677T C／T基因型；27例(39.7％)為MTHFR C677T C／C基因型；12例(17.6％)為MTHFR C677

5、T T／T基因型。免疫組化結(jié)果顯示:68例大腸癌患者中,P—gp表達(dá)陽性的32例,陽性表達(dá)率為47.1％(32／68)；且P—gp的表達(dá)與大腸癌的分化程度、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移以及Duke’s分期均無相關(guān)性(p>0.05)。其中,29例MTHFR C677T C／T基因型患者中,P—gp表達(dá)陽性的17例,陽性表達(dá)率為58.6％(17／29)；27例MTHFR C677T C／C基因型患者中,P—gp表達(dá)陽性的14例,陽性表達(dá)率為51.9％(1

6、4／27)；12例MTHFR C677T T／T基因型患者中,P-gp表達(dá)陽性的1例,陽性表達(dá)率為8.3％(1／12)。
　　 所檢測的68例大腸癌患者中,MTHFR C677T T／T基因型患者的P-gp的陽性表達(dá)率(8.3％)顯著低于MTHFR C677T C／T基因型患者的58.6％(x2=8.715,P=0.003),同樣顯著低于MTHFR C677T C／C基因型患者的51.9％(x2=6.647,p=0.01),而M

7、THFR C677T C／T基因型患者與MTHFRC677T C／C基因型患者之間P-gp的陽性表達(dá)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.259,p=0.611)。
　　 結(jié)論:
　　 1.P—gp的表達(dá)與大腸癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及Duke’s分期均無關(guān),提示P—gp在大腸癌中的表達(dá)可能與其發(fā)展無關(guān),表達(dá)可能具有先天性。
　　 2.MTHFR C677T T／T基因型與大腸癌組織中P—gp的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),因此檢測大腸