山東地區(qū)非綜合征性唇腭裂與MTHFR基因C677T和BMP4基因T538C多態(tài)性的相關(guān)性研究.pdf

1、一、目的和意義
　　 1.目的
　　 1.1研究亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T多態(tài)性與山東地區(qū)非綜合征性唇腭裂(NSCL/P)的相關(guān)性。
　　 1.2研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP4)基因T538C多態(tài)性與山東地區(qū)非綜合征性唇腭裂(NSCL/P)的相關(guān)性。
　　 1.3研究亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T和骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP4)基因T538C多態(tài)性在山東地區(qū)非綜合征性

2、唇腭裂的致病中是否存在關(guān)聯(lián)性。
　　 2.意義
　　 2.1從分子生物學(xué)水平研究亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T和骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP4)基因T538C多態(tài)性與NSCL/P的關(guān)系,探討NSCL/P發(fā)生的機(jī)制。
　　 2.2確定非綜合征性唇腭裂的易感基因,為NSCL/P的出生進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估。進(jìn)一步為臨床有效的預(yù)防和監(jiān)測唇腭裂缺陷兒的出生提供依據(jù),有利于我國的計(jì)劃生育和優(yōu)生優(yōu)育工作。
　　

3、二、方法
　　 1.本研究于2008年10月在山東大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院山東省口腔生物醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、山東省優(yōu)生技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。對2005年8月至2008年10月曾在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院口腔頜面外科采取手術(shù)治療的來自山東地區(qū)的NSCL/P患者家庭66組和同期健康查體的正常家庭50組進(jìn)行檢測。
　　 2.按要求采集患者家庭成員和對照組家庭成員的外周血液。用常規(guī)酚/氯仿抽提法提取DNA,其濃度用紫外分光光度計(jì)測定。DNA熱循環(huán)儀進(jìn)行

4、PCR擴(kuò)增。(已知引物、PCR反應(yīng)體系)采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性分析(PCR-RFLP)方法檢測基因型。酶切產(chǎn)物電泳分離及銀染顯色后觀察結(jié)果。
　　 3.分別統(tǒng)計(jì)患者組和對照組個(gè)體及家庭成員的基因型和等位基因,通過Hardy-Weinberg平衡檢測,并用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行x2檢驗(yàn)計(jì)算病例組與對照組基因型及等位基因頻率的差別及構(gòu)成比的差別,相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)值分析和95％可信區(qū)間的計(jì)算以及相關(guān)性的檢測。
　　 三、結(jié)

5、果
　　 1.MTHFR基因?qū)THFR C677T基因進(jìn)行分析,計(jì)算得到攜帶T等位基因的父母的子代患非綜合征性唇腭裂的危險(xiǎn)性是不攜帶T等位基因的父母的子代的2.278倍;TT突變純合子患非綜合征性唇腭裂的危險(xiǎn)性是非TT純合子的4.690倍;母子都足TT突變純合子的子代患非綜合征性唇腭裂的危險(xiǎn)性是非母子都是TT純合子的子代3.296倍。
　　 2.BMP4基因?qū)MP4 T538C基因進(jìn)行分析,計(jì)算得到攜帶C等位基因的父

6、母的子代患非綜合征性唇腭裂的危險(xiǎn)性是不攜帶C等位基因的父母的子代的1.914倍:CC突變純合子患非綜合征性唇腭裂的危險(xiǎn)性是非CC純合子的3.375倍。
　　 3.MTHFR基因C677T和BMP4基因T538C多態(tài)性的聯(lián)合作用與非綜合征性唇腭裂的關(guān)系由非條件Logistic回歸模型計(jì)算,以MTHFR(CC)基因型和BMP4(TT)基因型為參照,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,P均>0.05,結(jié)果無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 四、結(jié)論
　

7、　 1.山東地區(qū)NSCL/P與MTHFR基因C677T的多態(tài)性相關(guān),與父母的基因型存在聯(lián)系。T基因在母子組合的研究中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,父母傳遞給子代的T等位基因?qū)蟠幕疾∮兄匾饔谩?br>　　 2.山東地區(qū)NSCL/P與BMP4基因T538C的多態(tài)性相關(guān),與父母的基因型存在聯(lián)系。C基因在母子組合的研究中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,父母傳遞給子代的C等位基因?qū)蟠幕疾∮兄匾饔谩?br>　　 3.MTHFR基因C677T和BMP4基因T538C