石斑魚APC相關(guān)基因在刺激隱核蟲感染后的表達分析.pdf

1、抗原遞呈細胞（Antigen-presenting cell，APC）是一類可在其細胞表面表達主要組織相容性復合體（Major histocompatibility complexes,MHCs）并將加工后的抗原信息通過T細胞受體（T cell receptors,TCR）遞呈給T細胞的細胞。專職抗原遞呈細胞包括：樹突狀細胞、巨噬細胞和B細胞。這些細胞通過多種方式獲得抗原后，可對抗原進行加工并與MHC II類分子結(jié)合后激活T細胞，啟動適

2、應(yīng)性免疫反應(yīng)。刺激隱核蟲作為一種寄生性海水纖毛蟲，對熱帶和亞熱帶海水魚類危害極其嚴重。大量實驗證明了刺激隱核蟲的感染可引起海水魚類的適應(yīng)性免疫應(yīng)答。為揭示抗原遞呈細胞在刺激隱核蟲感染過程中可能發(fā)揮的作用，本文基于刺激隱核蟲感染斜帶石斑魚后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫，克隆獲得了7個APC相關(guān)基因（EcIL-34、EcMCSF2、EcMCSFR2、EcCCR6A、EcCCR6B、EcCD83和 EcCD208）的ORF序列。其中巨噬細胞相關(guān)基因 EcI

3、L-34、EcMCSF2和EcMCSFR2等分子的ORF分別為657 bp、804 bp和3141 bp，分別編碼218、267和1046個氨基酸，理論原子質(zhì)量為25.50 kDa、31.02 kDa和117.72 kDa。樹突狀細胞相關(guān)基因EcCCR6A、EcCCR6B、EcCD83和EcCD208等分子的ORF分別為1134 bp、1089 bp、675 bp和771 bp分別編碼377、362、224和256個氨基酸，理論原子質(zhì)量

4、為43.03 kDa、40.81 kDa、24.78 kDa和28.12kDa。序列的結(jié)構(gòu)，同源性和進化樹分析結(jié)果認為這7個基因均與在其他物種上報道的同源基因相似。組織分布結(jié)果顯示APC相關(guān)基因雖然存在不同的表達模式，但主要在免疫組織中表達。EcIL-34主要在腦組織表達，緊接著在鰓、脾臟、皮膚和肌肉等部位均有表達，而在肝臟和胸腺則表達較少；EcMCSF2則在頭腎和中腎表達量最高，在鰓和胸腺表達量較少；EcMCSFR2在脾臟，頭腎和鰓中

5、高表達，而在肌肉、胸腺和心臟中低表達。兩個EcCCR6均在鰓上表達量最高，而在心臟、肝臟和肌肉中均沒有檢測到表達量；在腦中主要表達 EcCCR6A而在頭腎和中腎中則主要表達 EcCCR6B，兩者在其余組織中表達量相近。EcCD83在胸腺上表達量最高，在非淋巴組織表達較低；EcCD208在中腎表達量最高，緊接是在鰓、皮膚、腦和心臟表達，而在其余組織表達量很低。對 APC相關(guān)基因在刺激隱核蟲感染后的表達譜分析發(fā)現(xiàn)，所有6個表面分子（EcMC

6、SFR1、EcMCSFR2、EcCCR6A、EcCCR6B、EcCD83和EcCD208）均在感染后的皮膚上顯著上調(diào)，一方面可能是這6個表面分子在其陽性細胞上的表達量上調(diào)，另一方面可能是更多該分子的陽性細胞聚積到感染部位的皮膚上。而在感染后的其余部位，雖然各個分子間的表達存在差異，但總體上，在鰓和頭腎上也是上調(diào)表達較多，而在脾臟上則是普遍下調(diào)表達，推測可能是抗原遞呈細胞從系統(tǒng)免疫器官遷移到感染部位進行免疫反應(yīng)的結(jié)果。綜上所述，初步推測石