2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩60頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:探討國產(chǎn)雷帕霉素(宜欣可)對人淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞的體外抗增殖作用及對細(xì)胞周期的影響,并探討其分子機(jī)制。 方法:常規(guī)體外培養(yǎng)人淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞,采用四甲基偶氮唑藍(lán)(tetrzolium-based colorimetric assay,MTT)法檢測國產(chǎn)雷帕霉素不同濃度組(0、1、5、10、20、40、50、100nmol/ml)、不同時(shí)間組(24、48、72h)細(xì)胞存活和生長的情況,從而選擇適當(dāng)?shù)乃幬餄舛燃白?/p>

2、用時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)一步的檢測。根據(jù)上述MTT結(jié)果,篩選不同濃度的實(shí)驗(yàn)組(5、10、20、40、50、100nmol/ml)分別與陽性對照組比較;篩選不同時(shí)間(24、48h)的實(shí)驗(yàn)組與12小時(shí)實(shí)驗(yàn)組(MTT試驗(yàn)抑制增殖不明顯)及各自相應(yīng)的陽性對照組比較,并用流式細(xì)胞儀(flow cytometry,F(xiàn)CM)測定各組國產(chǎn)雷帕霉素對Raji細(xì)胞周期分布和凋亡的影響,然后提取經(jīng)國產(chǎn)雷帕霉素50nmol/ml作用不同時(shí)間(0、12、24、48、72h

3、)的細(xì)胞總蛋白,考馬斯亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線法(Bradford法)定量,以β-actin作為內(nèi)參照,應(yīng)用western blot方法檢測不同組別周期蛋白cyclinD1、cyclinE、cyclinA、p27及凋亡蛋白抑制因子survivin蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果: 1.MTT結(jié)果:國產(chǎn)雷帕霉素對Raji細(xì)胞具有抑制增殖的作用。不同濃度國產(chǎn)雷帕霉素(1、5、10、20、40、50、100nmol/ml)處理細(xì)胞24、48、72小

4、時(shí)后,與對照組相比各處理組吸光度值(OD)均有不同程度的下降,經(jīng)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)后顯示,國產(chǎn)雷帕霉素處理24小時(shí)后藥物濃度為1nmol/ml和5nmol/ml的處理組與相應(yīng)對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;藥物處理48小時(shí)和72小時(shí)后濃度為1nmol/ml的處理組與相應(yīng)的對照組比較也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其余各不同濃度、不同時(shí)間點(diǎn)的藥物處理組與相應(yīng)的對照組之間具有顯著性差異(P<0.05)。且隨著國產(chǎn)雷帕霉素處理濃度的增大、作用時(shí)間的延長、OD值

5、逐漸下降,即國產(chǎn)雷帕霉素對Raji細(xì)胞的增殖抑制作用有明顯的劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)依賴關(guān)系。 2細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡檢測:流式細(xì)胞儀檢測國產(chǎn)雷帕霉素處理后的Raji細(xì)胞周期分布和凋亡情況顯示,不同濃度不同時(shí)間點(diǎn)國產(chǎn)雷帕霉素處理后的Raji細(xì)胞均未見到明顯的亞二倍體凋亡峰。但隨著藥物濃度的加大、藥物作用時(shí)間的延長,處于G0/G1期的細(xì)胞逐漸增多,而處于S期和G2/M期的細(xì)胞則逐漸減少。即國產(chǎn)雷帕霉素處理后的Raji細(xì)胞沒有明顯的凋亡,而細(xì)胞

6、周期進(jìn)程阻滯于G0/G1期,且該作用呈明顯的劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)依賴關(guān)系。 3.Western blot檢測結(jié)果:國產(chǎn)雷帕霉素50nmol/L處理后cyclinD1、cyclinE、p27的表達(dá)沒有明顯變化。在國產(chǎn)雷帕霉素處理后不能檢測到cyclinA和survivin蛋白的表達(dá)。 結(jié)論: 1國產(chǎn)雷帕霉素(宜欣可)通過阻滯Raji細(xì)胞周期于G0/G1期而抑制Raji細(xì)胞的生長、增殖,其機(jī)制與下調(diào)cyclinA和

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論