化療藥物誘導(dǎo)NK-T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株凋亡的研究.pdf

1、【目的】NK/T細(xì)胞淋巴瘤屬于惡性度較高的淋巴瘤，好發(fā)生于鼻部及其周圍組織，具有高度進(jìn)展性和侵襲性的特點(diǎn)?；颊咭话泐A(yù)后較差，生存期較短，對(duì)常規(guī)的化療方案敏感性差，易于復(fù)發(fā)。放療在早期患者中發(fā)揮重要作用，但有效的化療在提高CR率和降低全身復(fù)發(fā)方面仍然有重要作用，特別是對(duì)于晚期和鼻外病變患者。用傳統(tǒng)的方案（如CHOP環(huán)磷酰胺+多柔比星+長(zhǎng)春新堿+潑尼松）常規(guī)化療療效不佳。需要探索更有效的化療方案以提高有效率和生存期。
　　【方法】應(yīng)用

2、MTT技術(shù)觀察化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率，并選單藥敏感的藥物組合2-3方案，各方案中以各藥物濃度按單藥終濃度的0.25、0.50、0.10各設(shè)計(jì)三組,再次應(yīng)用MTT技術(shù)觀察化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率；并收集不同藥物組作用24—48小時(shí)的細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，及用顯微鏡觀察細(xì)胞染色質(zhì)、胞漿及細(xì)胞的生長(zhǎng)變化，提取DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)凋亡梯度，以研究化療藥物對(duì)NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株的誘導(dǎo)凋亡作用，為NK/T細(xì)胞淋巴瘤臨床

3、化療方案的選擇提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　【結(jié)果】13種化療藥物對(duì)NK/T細(xì)胞淋瘤細(xì)胞的體外抑制作用：（1）在設(shè)定的單藥藥物濃度中，根據(jù)抑制率的大小由高到低依次為：長(zhǎng)春瑞濱、表柔比星、多西他賽、多柔比星、阿糖胞苷、美羅華、吉西他濱、門冬酰胺、順鉑、紫杉醇、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、長(zhǎng)春新堿；其中長(zhǎng)春瑞濱、表柔比星、多西他賽、多柔比星達(dá)到中度敏感。（2）根據(jù)單藥體外試驗(yàn)的敏感性及藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的周期特異性，我們共設(shè)四組化療方案進(jìn)行MTT試驗(yàn)及

4、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，抑制率的大小由高到低依次為：A：長(zhǎng)春瑞濱+表柔比星、C：多西他賽+表柔比星、D：多西他賽+多柔比星、B：長(zhǎng)春瑞濱+多柔比星。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上，實(shí)驗(yàn)組的右象限(Q2、4)可見(jiàn)不同比例的凋亡細(xì)胞，與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），倒置顯微鏡下觀察，可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，形態(tài)皺縮變小，輪廓欠清晰，核染色質(zhì)濃集；從試驗(yàn)組細(xì)胞中提取的DNA經(jīng)電泳后，紫外燈下可見(jiàn)特征性的“梯狀(1adder)帶