10種化療藥物誘導T細胞淋巴瘤細胞株Jurkat凋亡的研究.pdf

1、目的：探索10種臨床常用化療藥物對T細胞淋巴瘤細胞株Jurkat的增殖抑制及誘導凋亡作用，為TCL臨床化療方案的選擇提供初步實驗依據。
　　方法：本實驗選用Jurkat細胞株作為研究對象，將臨床常用的10種化療藥以不同濃度（終濃度的0.25、0.50、0.75、1.00）分別作用于對數生長期的Jurkat細胞24h、48h、72h，采用四甲基偶氮唑藍（MTT）法檢測細胞的增殖抑制率；收集不同藥物作用24h后的細胞，采用Annexi

2、n V/PI雙染法檢測細胞凋亡率。選擇單藥敏感的藥物聯(lián)合使用，聯(lián)用方案中各藥物濃度同單藥處理濃度,再次采用MTT及Annexin V/PI雙染法測定細胞的增殖抑制率及凋亡率；并使用倒置顯微鏡觀察Jurkat細胞生長的形態(tài)學變化、Hoechst33258染色后熒光顯微鏡下觀察藥物處理 Jurkat細胞后核染色質的形態(tài)學變化、DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測凋亡梯度。
　　結果：⑴在單藥體外敏感實驗中,細胞增殖抑制率的大小依次為：表柔比星>長

3、春瑞濱>吉西他濱>多西他賽>環(huán)磷酰胺>順鉑>紫杉醇>長春新堿>利妥昔單抗>門冬酰胺酶；其中表柔比星達到高度敏感，長春瑞濱、吉西他濱、多西他賽達到中度敏感。Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡率結果與MTT結果一致，且與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。⑵在聯(lián)合藥物體外敏感實驗中,細胞增殖抑制率的大小依次為：表柔比星+吉西他濱+長春瑞濱>表柔比星+吉西他濱+多西他賽。Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡率結果與M

4、TT結果一致，與陰性對照組相比差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01）;與單藥組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。倒置顯微鏡下觀察細胞，可見實驗組細胞增殖緩慢，輪廓不清晰，體積皺縮變小，包膜不完整，核染色質固縮濃集，出現凋亡小體。Hoechst33258染色后以紫外光340nm波長激發(fā)，在熒光顯微鏡下觀察細胞核染色質，可見凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染，呈強藍色。從實驗組細胞中提取的DNA經電泳后，紫外燈下可見特征性的“