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1、背景與目的: EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),鼻咽癌患者血清/血漿中存有大量的EBV-DNA,且將血漿/血清EBV-DNA檢測作為鼻咽癌早期診斷和治療預(yù)后監(jiān)測的重要指標(biāo)。但對于鼻咽癌患者血漿/血清EBV-DNA來源一直是人們關(guān)注的焦點,新近研究發(fā)現(xiàn)鼻咽癌患者血漿EBV-DNA可能來源于腫瘤組織。本文通過檢測鼻咽癌患者EBV-DNA水平與鼻咽癌原位組織細(xì)胞凋亡相關(guān)性,明確血漿/
2、血清EBV-DNA與鼻咽癌組織細(xì)胞凋亡的關(guān)系,為闡明鼻咽癌血漿/血清EBV-DNA來源提供實驗依據(jù)。 方法: 1.觀察對象中南大學(xué)湘雅醫(yī)院2006年10月至2008年1月耳鼻喉科和放療科門診疑似鼻咽癌患者,病理活檢確定為鼻咽癌28例。 2.EBV-DNA檢測常規(guī)采集鼻咽癌患者靜脈全血3-5ml,離心分離,獲取血漿。提取血漿病毒DNA,采用巢式熒光定量PCR檢測EBV-DNA的含量,計算患者血漿EBV-DNA拷貝數(shù)
3、中位數(shù)。 3.鼻咽癌組織細(xì)胞凋亡檢測病理切片采用TUNEL法進行細(xì)胞凋亡檢測。 4.EBV-DNA與鼻咽癌細(xì)胞凋亡情況相關(guān)性分析。 結(jié)果: 1.熒光定量PCR檢測鼻咽癌患者血漿EBV-DNA,鼻咽癌患者血漿EBV-DNA的檢出率為96.4%(27/28),中位數(shù)為1800 copies/μl(0~22100 copies/μl)。 2.細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果表明,28例鼻咽癌活檢組織的腫瘤細(xì)胞平均凋亡指
4、數(shù)25.6±3.53。在27例血漿EBV-DNA檢測為陽性的鼻咽癌患者中,鼻咽癌細(xì)胞平均凋亡指數(shù)為26.1±3.47。 3.通過分析EBV-DNA拷貝數(shù)與鼻咽癌細(xì)胞凋亡指數(shù)的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)EBV-DNA拷貝數(shù)與鼻咽癌細(xì)胞凋亡呈正相關(guān)(p<0.05)。 結(jié)論: 通過分析鼻咽癌患者血漿EBV-DNA拷貝數(shù)與鼻咽癌細(xì)胞凋亡數(shù),明確了EBV-DNA水平與鼻咽癌細(xì)胞呈正相關(guān)。從而推斷鼻咽癌患者血清EBV-DNA可能部分來源凋
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