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文檔簡介
1、 本研究首先利用由oligo6.0，NCBIBlast和PrimerPremier5軟件去設(shè)計(jì)和篩選全EBV基因組cDNA探針，我們將這些探針的長度限定在300-600mer。然后，通過PCR和RT-PCR方法從B95-8細(xì)胞和NPC組織的基因組DNA和RNA中擴(kuò)增這些探針，接著克隆入T/A克隆載體和測序鑒定。探針通過一對設(shè)計(jì)于載體多克隆兩端的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。產(chǎn)物純化后，探針被打印在Corning玻片上。通過與Cy3標(biāo)記的B9
2、5-8細(xì)胞cDNA進(jìn)行雜交反應(yīng)，B95-8細(xì)胞內(nèi)EBV基因表達(dá)被檢測。隨后，基因芯片結(jié)果采用了兩種方法分別進(jìn)行了驗(yàn)證。 進(jìn)一步利用3組基因芯片數(shù)據(jù)，從腫瘤的血管生成、細(xì)胞的黏附、蛋白激酶、NEM1轉(zhuǎn)移抑制基因等方面去研究鼻咽癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制，以及篩選與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因。HGF、BPAG1、VLA-2、CTSD、MMP1等基因能作為血管生成、黏附分子及其受體、蛋白激酶的代表基因，正向調(diào)控鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。而COL18A1、NEM1
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