刺猬蛋白對(duì)小鼠耳蝸多潛能祖代細(xì)胞的分化作用.pdf

1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文刺猬蛋白對(duì)小鼠耳蝸多潛能祖代細(xì)胞的分化作用姓名：胡曉華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：黃建民;林國(guó)經(jīng)20090401T h ee f f e c t o fs o n i ch e d g e h o g o nt h ed i f f e r e n t i a t i o no fc o c h l e a rn e u r a l p r o g e n i t o r so fm i c e

2、 i n v l t r oP o s t g r a d u a t e H U X i a o h u aT u t o r s H U n GJ i a n m i nL I NG u o j i n gO b j e c t i v e ：T o s t u d yt h ei n f l u e n c eo f s o n i ch e d g e h o g ( S h h ) o nt h ed i f f e r e

3、n t i a t i o no f c o c h l e a rn e u r a l p r o g e n i t o r s ( C N P s ) o fm i c e ．i I e t h o d s ：C o c h l e a rn e u r a l p r o g e n i t o r sw e r e i s o l a t e df r o m t h ep o s t n a t a ld a y 1 o

4、r g a no f C o r t i o f m i c e ．C e l i s w e r ed i v i d e d i n t o t h r e eg r o u p s ：S h ht r e a t m e n t ，p h o s p h a t e —b u f f e r e ds a l i n e ( P B S ) c o n t r 0 1 ．a(chǎn) n dS h ht r e a t m e n tp l

5、 u sL Y 2 9 4 0 0 2 ( a s p e c i f i ci n h i b i t o rf o r t h eA k tp a t h w a y ) ．M a m m a i i a na t o n a lh o m o l o g l ( ^ ／s t h l0 1 “ A t o M ) ，at r a n s c r i p t i o nf a c t o r ，i su s e d a s am a

6、 r k e rf o rt h e i n i t i a l d i f f e r e n t i a t i o no f a u d i t o r y h a i rc e l l s ．T h ee x p r e s s i o no fM a t h lm R N Aw a se v a l u a t e db y R T —’P C R a n d l u c i f e r a s ea s s a y sa t

7、 2 4 h o u r s ．T h ee x p r e s s i o n o fM s t h l p r o t e i nw a se v a l u a t e db yi m m u n o h i s t o c h e m i s t r ya n d f l o wc y t o m e t r ya t 4 8 h o u r s ．T h ee f f e c to fS h ho n t h ep r o I

8、 i f e r a t i o no f C N P s w e r ee v a l u a t e dw i t h c o m p r e h e n s i v em e t h o d s ：i ) c e l l c y c l ep r o g r e s s i o n ( f l o wc y t o m e t r y ) ，i i ) 5 - b r o m o 一2 一d e o x y u r i d i n

9、 ei n c o r p o r a t i o n ，a n d i i i ) c e l l a p o p t o s i s ．R e s u l t s ：S h h i n c r e a s e dt h e e x p r e s s i o no f 腸t h lm R N At r a n s c r i p t sb yR T —P C R ， ( p < 0 ．0 5 ) t h ep r o m o

10、t e ra c t i v i t y o fg a t h lb y l u c i f e r a s e a s s a y s ，( p ( 0 ．0 5 ) t h ee x p r e s s i o n o f M a t h lp r o t e i nb y i m m u n o h i s t o c h e m i s t ya n df l o w c y t o m e t r y ( 仄0 ．0 5 )

11、．L Y 2 9 4 0 0 2s i g n i f i c a n t l ya t t e n u a t e dt h eS h h —i n d u c e dp r o m o t e ra c t i v i t y o fM a t h lb y l u c i f e r a s ea s s a y sa n dt h e S h h —。i n d u c e de x p r e s s i o n o f M