Rybp基因?qū)η卮ㄅ３杉〖毎只饔玫难芯?pdf

1、隨著人們生活水平不斷提高，牛肉作為一種高蛋白低膽固醇的健康食品越來越受到人們的青睞，市場牛肉的需求量越來越大，供給不足，牛肉價格持續(xù)上漲。如何提高牛肉產(chǎn)量和改善牛肉品質(zhì)成為廣大育種工作者關(guān)注的熱點，而對肉牛肌肉組織生長發(fā)育調(diào)控機制的研究將從分子水平揭示影響肉牛產(chǎn)肉性能和牛肉品質(zhì)形成的機理，為肉牛的分子育種工作奠定基礎(chǔ)。Ring和YY1結(jié)合蛋白(Ring and YY1binding protein，Rybp)已在小鼠上被證實對肌生成具有

2、抑制作用，而在牛上還未見相關(guān)報道，仍需要進一步研究。本研究以Rybp基因為目標基因，利用實時定量PCR技術(shù)，檢測了該基因在秦川牛16種組織、5個不同發(fā)育階段肌肉、脂肪組織以及不同分化階段牛成肌細胞中表達水平，利用腺病毒介導(dǎo)該基因在成肌細胞中過量表達，探究Rybp基因?qū)ε３杉〖毎只淖饔?，通過轉(zhuǎn)錄組測序，篩選和鑒定過量表達Rybp基因后的差異表達基因，初步揭示了Rybp基因在牛成肌細胞分化過程中的功能及其對一些重要的成肌細胞分化相關(guān)基因

3、的影響。獲得的主要研究結(jié)果如下:
　　1.秦川牛Rybp基因表達特性分析結(jié)果表明，Rybp基因在成年秦川牛睪丸組織中表達量最高，而在背最長肌、里脊、心臟等組織中的表達量相對較低;隨著秦川牛年齡的增加，Rybp基因在肌肉組織中的表達水平逐漸升高，在脂肪組織中的表達水平顯著下降;在不同分化階段成肌細胞中，隨著成肌細胞分化進程的推進，Rybp基因表達水平逐漸升高，而當分化減速后，Rybp基因表達水平逐漸降低。
　　2.克隆得到秦川

4、牛Rybp基因的CDS區(qū)序列，其長度為687bp，編碼229個氨基酸殘基，然后成功構(gòu)建并獲得了高滴度牛Rybp基因腺病毒過表達載體，病毒滴度為1×109pfu/mL。
　　3.在牛成肌細胞中過表達Rybp基因，可顯著抑制肌管的形成，這種差異從過表達后2d開始出現(xiàn)，到6d達到最顯著。將過表達Rybp基因6d后的成肌細胞與對照組細胞進行轉(zhuǎn)錄組測序，結(jié)果共篩選出1311個差異表達基因，其中有707個基因表達水平上調(diào)，604個基因表達水平