p38MAPK信號通路在應(yīng)力調(diào)控成肌細(xì)胞分化中的作用.pdf

1、目的:研究在應(yīng)力介導(dǎo)的C2C12細(xì)胞成肌分化過程中應(yīng)力對絲裂原活化蛋白激酶MAPK(Mitogen-ActivatedProteinKinase)信號通路中p38MAPK信號通路的影響。
　　 方法:將Bio-flex6孔培養(yǎng)板上貼壁培養(yǎng)24h的細(xì)胞，以0.5Hz的加載頻率和10％的細(xì)胞拉伸變形幅度，分別進(jìn)行拉伸培養(yǎng)2h、6h、12h、24h，應(yīng)用WesternBlotting免疫印跡法檢測總p38和磷酸化p-p38(Thr18

2、0/Tyr182)蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:周期性機(jī)械拉伸在調(diào)控C2C12成肌細(xì)胞分化過程中，p38MAPK信號通路被激活。p38MAPK信號通路蛋白磷酸化水平在加力6小時(shí)內(nèi)達(dá)到峰值;繼續(xù)加力，磷酸化p38MAPK蛋白的表達(dá)稍有下降，但仍然維持在較高水平。而總p38MAPK蛋白表達(dá)維持在同一基線水平，各組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。加入p38MAPK信號通路特異性抑制劑—SB203580后再加力，成肌調(diào)節(jié)因子Myogenin的表達(dá)明