p38MAPK信號通路參與膿毒癥小鼠血小板減少的調(diào)控.pdf

1、目的：探討p38MAPK在膿毒癥小鼠血小板減少中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制。
　　方法：將60只C57BL/6雄性小鼠隨機分為陰性對照組（Control組）、膿毒癥組（LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)組）、SB203580＋LPS組（SB203580組）。連續(xù)4天檢測外周血中血小板數(shù)量及炎癥因子IL-6、TNF-α表達量；于LPS注射后24小時提取血小板，部分連接熒光抗體顯微鏡下觀察其形態(tài)變化，部分充分裂解測定磷酸化p3

2、8mapk的表達量；取小鼠肺組織制成冰凍切片行免疫組化染色觀察血小板肺滯留情況。
　　結(jié)果：（1）外周血中炎癥因子的濃度檢測：LPS注射后1-4天連續(xù)檢測TNF-α，IL-6的濃度，發(fā)現(xiàn)LPS組明顯高于對照組和SB203580組(P<0.05)，且在2-3天時達到峰值。而Control組和SB203580組無顯著性差異（P>0.05）。
　?。?）血小板活化檢測：○1血小板形態(tài)變化：LPS注射后24小時，倒置熒光顯微鏡觀察發(fā)

3、現(xiàn)，Control組血小板是大小相似的圓盤狀形，LPS組血小板大小不等，多數(shù)是腫脹的并帶有幾個指樣突觸。SB203580組血小板與Control組形態(tài)上無明顯差異；○2血小板磷酸化p38mapk表達量：LPS注射24小時后，LPS組磷酸化p38mapk的條帶灰度值明顯高于Control組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）外周血中血小板數(shù)量檢測：血細胞分析儀檢測LPS注射后1-4天血小板計數(shù)變化依次為（單位為(x?±s

4、）×109/L)：Control組：656.6±181.7782，733.8±162.7689,676.6±146.0303,614±153.421；LPS組：255±44.3565,164±42.2295,202±53.7308；418；SB203580組：513.75±104.5702；497.25±98.0523；611.75±110.4578；590.5±94.6027。LPS組與Control組、SB203580組比較差異顯著

5、（P<0.05）,有統(tǒng)計學(xué)意義，LPS組血小板減少在實驗的第2-3天達峰值；Control組、SB203580組比較無明顯差異（P>0.05）。
　?。?）血小板肺組織滯留情況：肺組織冰凍切片免疫組化發(fā)現(xiàn)，LPS組肺組織間隙有大量血小板滯留,而Control組、SB203580組未見明顯血小板滯留；
　　結(jié)論：1.嚴重膿毒癥可致炎癥細胞因子IL-6、TNF-a顯著升高；
　　2、嚴重膿毒癥時，外周血中存在大量血小板活化